Infectious bursal disease virus (IBDV) is the causative agent of infectious bursal disease, a nosologic entity with global economic importance in poultry. The viral protein 2 (VP2) is recognized as the virus' major antigenic protein. The goal of this study was to generate yeast (Pichia pastoris)–based protein expression from the VP2 gene of the Edgar strain of IBDV and from the hypervariable region of the VP2 gene (hvVP2) to test the protection afforded against virulent IBDV challenge when inoculated in chickens. The genetic material used for protein expression was obtained from paraffin-embedded tissue. Specific-pathogen-free chickens were vaccinated with the expressed products and challenged with the homologous strain (Edgar). After challenge, no morbidity or mortality was observed in the birds vaccinated with the whole VP2, compared with 30% morbidity and mortality in the hvVP2-vaccinated birds and with 90% morbidity and 60% mortality in the unvaccinated, challenged controls. Immunohistochemistry detection of the challenge virus and some extent of bursal damage were observed in all challenged birds, indicating active replication of the challenge virus despite vaccination. As determined by bursal index values, the protection against postchallenge bursal atrophy was significantly higher (P < 0.05) in the VP2 group than in the unvaccinated and hvVP2-vaccinated birds. Overall, the results indicated that paraffin-embedded tissue can be used as a source of genomic material for transgenic protein expression, that Pichia pastoris–expressed VP2 retains its immunogenicity, and that VP2 subunit vaccination conferred partial protection to challenge; it protected against clinical signs and death but not against IBDV infection.
Abbreviations: ATCC = American Type Culture Collection; FFPE = formalin-fixed paraffin-embedded; hvVP2 = hypervariable region of the VP2 gene; IBD = infectious bursal disease; IBDV = infectious bursal disease virus; IHC = immunohistochemistry; LB = Luria-Bertani; PBS = phosphate-buffered saline; pVP2 = VP2 precursor; RT-PCR = reverse transcriptase polymerase chain reaction; SPF = specific-pathogen-free
Nota de Investigación—Vacunación contra la enfermedad infecciosa de la bolsa con una vacuna subunitaria.
El virus de la enfermedad infecciosa de la bolsa es el agente causal de esta importante condición patológica presente en todo el mundo. La proteína viral 2 (VP2 por sus siglas en Inglés) se reconoce como la principal proteína antigénica del virus. El propósito de este estudio fue el de generar, usando la levadura Pichia pastoris, la expresión de la proteína completa VP2 obtenida de la cepa Edgar, lo mismo que la región hipervariable del gen VP2 (hvVP2), para evaluar la protección en pollos frente a un desafío virulento con virus patógeno de Gumboro. El material genético usado para la expresión de la proteína fue obtenido de tejidos incluidos en parafina. Aves libres de patógenos específicos fueron vacunadas con los productos expresados y desafiadas con la cepa homóloga (cepa Edgar). No se observó morbilidad o mortalidad en las aves vacunadas con la proteína VP2 completa, comparada con el 30% de morbilidad y mortalidad obtenido en las aves vacunadas con la región hipervariable hvVP2 y con el 90% de morbilidad y mortalidad observada en los controles no vacunados y desafiados. Por medio de la inmunohistoquímica, en todas las aves desafiadas se detectó el virus de desafío lo mismo que leves lesiones en la bolsa, indicando la replicación activa del virus de desafío a pesar de la vacunación. Como se determinó por los valores de los índices bursales obtenidos, la protección frente a la atrofia de la bolsa fue significantemente mayor (P < 0.05) en el grupo vacunado con la proteína VP2
