The Marek's disease virus (MDV) vaccine strain CVI 988 usually is grown in primary chicken embryo fibroblasts (CEFs). We found that the strains could be grown also in the QT35 and JBJ-1 cell lines to titers in the same range as in the CEFs. Both cell lines are fibroblast-like cell lines, which can be grown in flat-bottomed tissue-culture flasks, roller bottles, and on microcarriers. For growth in QT35 cells it was necessary to adapt the virus to the cell line; for growth in JBJ-1 cells this was not necessary. We investigated the efficacy of experimental CVI 988 vaccines grown in QT35 cells and JBJ-1 cells. The efficacy studies were performed in accordance with European Pharmacopoeia (EP) monograph for live MDV disease vaccines. Groups of 1-day-old specific-pathogen-free chicks were vaccinated. Nonvaccinated control groups were included in the studies. Five to 7 days after vaccination all chickens were challenged with the very virulent MDV strain RB1B. After challenge the chickens were observed for a period of 70 days for signs of MD. The protection induced by CVI 988 grown in QT35 cells as well as JBJ-1 cells complied with the requirements of the EP that prescribe that the protection index should be at least 80%. The safety of the vaccines grown in QT35 cells and JBJ-1 cells was tested in a field study in commercial layer chickens. The vaccine virus was not safe after passaging in QT35 cells. This can be explained by the presence of fragments of the genome of MDV strains in the QT35 cell line. No signs of MD were noticed in the study in which CVI988 grown in JBJ-1 cells was tested. It is concluded that the JBJ-1 cell line is a suitable substrate for the current vaccines against MD.
Eficacia y seguridad de los virus vacunales de Marek asociados a células y replicados en cultivos celulares QT35 y JBJ-1.
La cepa vacunal CVI 988 del virus de Marek usualmente se replica en cultivos primarios de embrión de pollo. Se determinó que las cepas también pueden ser replicadas en las líneas celulares QT35 y JBJ-1 produciendo títulos dentro del mismo rango a los que se observan con los cultivos de fibroblastos de embrión de pollo. Ambas líneas celulares son similares a los fibroblastos, que pueden replicarse en botellas de fondo plano, en botellas cilíndricas y en microacarreadores. Para el crecimiento en las células QT35, fue necesario adaptar el virus a esta línea celular. Para el crecimiento en la línea celular JBJ-1 no fue necesaria esta adaptación. Se investigó la eficacia de las vacunas experimentales con la cepa CVI 988 replicadas en las líneas celulares QT35 y JBJ-1. Se realizaron estudios de eficacia de acuerdo con la monografía de la Pharmacopoeia Europea para las vacunas vivas de la enfermedad de Marek. Se vacunaron grupos de pollos libres de patógenos específicos de un día de edad. Se incluyeron controles no vacunados en los estudios. De cinco a siete días después de la vacunación todos los pollos fueron desafiados con la cepa muy virulenta de la enfermedad de Marek RB1B. Después del desafío, los pollos se observaron por un periodo de 70 días para detectar signos de la enfermedad de Marek. La protección inducida por la cepa CVI 988 replicada en células QT35 así como en células JBJ-1 cumplió con los requerimientos de la Pharmacopoeia Europea que prescribe que el índice de protección debe ser de al menos 80%. La seguridad de las vacunas replicadas en la línea celular QT35 y JBJ-1 fue probada en un estudio de campo en aves de postura comerciales. El virus vacunal replicado en la línea celular QT35 no fue seguro después del pasaje. Esto puede explicarse por la presencia de fragmentos del genoma del virus de Marek en la línea celular QT35. No se observaron signos de la enfermedad de Marek en este estudio en donde se probó la cepa CVI988 replicada en células JBJ-1. Se concluye que la línea celular JBJ-1 es un substrato adecuado para las vacunas actuales contra la enfermedad