Please see the PDF version of the back matter.

Please see the PDF version of these advertisements.

Please see the PDF version of the front matter.

This account has two aims. The first is to provide a tribute to Dr. Pincus Philip Levine, the founder of Avian Diseases. It addresses several facets of the life and times of this remarkable and interesting personality, giving some insight into the why and how he came to establish the journal. It touches on his background; his character; his astute and searching mind; his ability to interact with others; his influence on veterinary, and especially avian, medicine; and his teaching genius and reveals the positive force he was in his interactions with others. Then, it turns to a celebration of the first half-century of the journal that he created, essentially single-handedly, and reviews some of the history regarding the stimulus, birthing pains, and gradual evolution of the journal through a succession of editors, business managers, and supporting casts to the publication that we see today, nearly 50 yr later.

Artículo histórico- Revista Avian Diseases (Enfermedades de las Aves): la creación y evolución del legado de P. Philip Levine.

Este artículo tiene dos objetivos. El primero es proporcionar un homenaje al Dr. Pincus Philip Levine, el fundador de la revista Avian Diseases (Enfermedades de las Aves). Este artículo abarca varios aspectos de la vida y tiempo de este personaje notable e interesante, y proporciona una idea de por qué y cómo él llegó a establecer la revista. Aborda a fondo su carácter; su mente astuta y de búsqueda, su capacidad de interactuar con los demás, su influencia en veterinaria; especialmente en medicina aviar y su genio educador revelan la fuerza positiva de sus interacciones con los demás. Posteriormente, el artículo se convierte en una celebración del primer medio siglo de la revista que él creó, prácticamente sin ayuda y revisa parte de la historia en relación con el estímulo, las dificultades de su creación y la evolución gradual de la revista a través de una sucesión de editores, de gerentes y de equipos de personas que han apoyado a la publicación actual, por casi 50 años.

Infectious laryngotracheitis (ILT) is a significant upper respiratory tract disease of chickens with a worldwide distribution. Differentiating between wild-type and vaccine strains of ILT virus (ILTV) would be useful for enhancing disease control, and in the early stages of a disease outbreak molecular diagnostic tools for the detection and differentiation of the circulating virus could be applied. This study developed TaqMan real-time PCR (qPCR) assays to detect and differentiate the glycoprotein G (gG)-deficient (ΔgG) ILTV candidate vaccine strain of ILTV from ILTV strains that contain the gG gene. The gG ve and gG-ve ILTV TaqMan assays were used in individual and multiplex format to detect, differentiate, and quantitate ILTV DNA in laboratory and clinical samples. The assays were highly sensitive and highly specific, with a detection limit of 10 viral template copies for each assay. Low interassay coefficients of variation were recorded (0.021–0.042 and 0.013–0.039) for gG ve and gG-ve TaqMan assays, respectively. The multiplex assay was successfully used to examine the replication kinetics of wild-type and ΔgG strains of ILTV in cultured leghorn male hepatoma cells and embryonated hen eggs under coinfection conditions. The results showed that the TaqMan qPCR assay, along with the ΔgG ILTV vaccine, has the potential to be used in a “Differentiating Infected from Vaccinated Animals” strategy for the control and eradication of ILT.

Desarrollo y validación de un ensayo de reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real con una sonda TaqMan para la detección cuantitativa y para diferenciar las cepas silvestres del virus de la laringotraqueitis infecciosa de una cepa candidata para vacuna que carece de la glicoproteína G.

La laringotraqueitis infecciosa aviar (ILT) es una enfermedad importante del tracto respiratorio superior del pollo y que tiene una distribución en todo el mundo. La diferenciación entre las cepas silvestres y vacunales sería útil para mejorar el control de la enfermedad y se podrían aplicar herramientas de diagnóstico molecular para la detección y diferenciación de los virus circulantes en las primeras etapas de un brote de la enfermedad. En este estudio se desarrolló un ensayo de PCR en tiempo real (qPCR) con sondas TaqMan para detectar virus que carecen de la glicoproteína G que son candidatos para vacunas contra la laringotraqueítis (ΔgG) y diferenciarlos de las cepas que contienen el gene gG. Los ensayos TaqMan gG ve y gG-ve se utilizaron en formatos individuales y múltiples para detectar, diferenciar y cuantificar el ADN viral en muestras del laboratorio y clínicas. Los ensayos fueron altamente sensibles y altamente específicos, con un límite de detección de 10 copias de ADN viral para cada ensayo. Se registraron bajos coeficientes de variación interensayo (de 0.021 a 0.042 y de 0.013 a 0.039) para los ensayos TaqMan gG ve y gG-ve, respectivamente. El ensayo múltiple se utilizó con éxito para estudiar la cinética de replicación de cepas silvestres y de cepas ΔgG del virus de la laringotraqueítis cultivados en células de hepatoma de machos Leghorn y en huevos embrionados de pollo en condiciones de coinfección. Los resultados mostraron que el ensayo TaqMan qPCR, junto con la vacuna ΔgG ILTV, tiene el potencial para ser utilizados en una estrategia de “diferenciación de animales infectados de animales vacunados” (DIVA) para el control y erradicación de la laringotraqueítis infecciosa aviar.

Since 1998, avian reovirus (ARV) infection has been detected in broiler and breeding chicken flocks in Tunisia. The genotype of avian reoviruses was established using simple and rapid approaches. Reverse transcription PCR (RT-PCR) on both sigma C (σC) and sigma B (σB)-encoding genes followed by restriction fragment length polymorphism (RFLP) analyses were used to better characterize Tunisian isolated strains. The RT-PCR amplified fragments of 738 and 540 bp for σC- and σB-encoding genes, respectively, of 15 ARV Tunisian strains. DNA fragments amplified from S1133 vaccine and isolated strains were digested with different restrictions enzymes. RFLP on the σC gene indicated that the field isolates and the S1133 vaccine strain have identical profiles when separately digested with TaqI, PstI, DdeI, and HincII. Considering the σB gene, RFLP profiles were identical with RsaI, BclI, DpnII, and NciI restriction enzymes for all the strains. However, using MseI and AciI enzymes, it was shown that all tested isolates could be clearly distinguished from the vaccine strain. ARV strains could be classified in groups with strong relatedness. Strain-typing based on cleavage site results are in agreement with ARV clustering based on nucleotide sequences of both the σC and σB genes. RT-PCR–RFLP provides a simple and a rapid approach for genotyping ARV isolates, especially when a large number of isolates are being studied. Additionally, this approach may also determine whether a new variant strain has been introduced into a flock or if a given virus strain is being spread from one flock to another.

Genotipificación y clasificación utilizando RT-PCR y análisis RFLP de cepas de reovirus aviar originarias de Túnez.

Desde 1998, la infección por reovirus aviar (ARV) se ha detectado en pollos de engorde y en parvadas de reproductoras en Túnez. El genotipo de los reovirus aviares se estableció utilizando métodos sencillos y rápidos. Se llevó a cabo la transcripción inversa y PCR (RT-PCR) de los genes C (σC) y sigma B (σB) seguido del análisis del polimorfismo de la longitud de los fragmentos de restricción (RFLP). Los análisis se utilizaron para caracterizar mejor las cepas aisladas de Túnez. El método de RT-PCR amplificó fragmentos de 738 pares de bases (pb) y de 540 pb que codificaban para los genes σC y σB, respectivamente, amplificados de quince cepas de reovirus aviar de Túnez. Los fragmentos amplificados de ADN de la vacuna S1133 y de las cepas aisladas se sometieron a la digestión con diferentes enzimas de restricción. Los patrones RFLP del gene σC indicaron que los aislamientos de campo y la cepa vacunal S1133 tienen perfiles idénticos cuando se digirieron por separado con la enzimas TaqI, PstI, DdeI y HincII. Teniendo en cuenta que los perfiles de RFLP del gen σB fueron idénticos con las enzimas de restricción RsaI, BclI, DpnII y NciI para todas las cepas. Sin embargo, mediante el uso de las enzimas MseI y AciI, se demostró que todos los aislamientos ensayados podían distinguirse claramente de la cepa vacunal. Las cepas de reovirus aviares pudieron clasificarse en grupos con una fuerte relación. Los resultados basados en los sitios de restricción estuvieron de acuerdo con la agrupación basada en las secuencias de nucleótidos de los genes σC y σB. El método de RT-PCR y seguido de RFLP proporciona un enfoque sencillo y rápido para la genotipificación de los aislamientos, especialmente cuando se analizan un gran número de aislamientos. Además, este enfoque también puede determinar si una nueva cepa variante se ha introducido en una parvada o si una cepa de un determinado virus está siendo propagada de una parvada a otra.

Eleven avian pathogenic Escherichia coli (APEC) strains isolated from 2006 to 2010 from different farms in Algeria and resistant to cephalosporins were studied. Their susceptibility to antimicrobials was determined by disk diffusion, and the genes responsible for resistance to critical antimicrobials were studied by PCR, sequencing, and conjugation. Their genetic profiles were compared by pulsed-field gel electrophoresis (PFGE). All strains were resistant to extended-spectrum cephalosporins, ciprofloxacin, tetracycline, trimethoprim-sulfamethoxazole, and neomycin and showed the same PFGE profile. For most of them, resistance was encoded by a nontransferable group 1 bla_CTX-M gene, and multiple mutations were detected in the quinolone resistance–determining regions. The clonal dissemination of this resistant APEC is worrying for animal and public health.

Primera descripción de un clon de Escherichia coli patogénico para las aves, originario de Argelia y con resistencia contra cefalosporinas de espectro extendido y contra fluoroquinolonas.

Se estudiaron once cepas de Escherichia coli patógena para las aves (APEC) aisladas entre el año 2006 al 2010 de diferentes granjas en Argelia y resistentes a las cefalosporinas. Su susceptibilidad a los antimicrobianos se determinó por difusión en disco y los genes responsables de la resistencia a los antimicrobianos críticos fueron estudiados por PCR, por secuenciación y por conjugación. Sus perfiles genéticos fueron comparados mediante electroforesis en gel con campos de pulsaciones (PFGE). Todas las cepas fueron resistentes a las cefalosporinas de espectro extendido, a la ciprofloxacina, tetraciclina, trimetoprim-sulfametoxazol y a la neomicina y mostraron el mismo perfil de PFGE. Para la mayoría de ellas, la resistencia fue codificada por un gene bla_CTX-M, del grupo 1 no transferible y se detectaron múltiples mutaciones en las regiones que determinan resistencia a las quinolonas. La diseminación clonal de esta cepa resistente de E. coli patógena para las aves es preocupante para la salud pública y animal.

In late spring of 2009 and 2010, there were reports of severe black fly (Simulium spp., shown in Fig. 1) outbreaks in various counties in Mississippi, especially those in and around the Mississippi River Delta. Complaints were of black flies attacking multiple species of backyard poultry and causing high morbidity and mortality in affected flocks. At several affected locations, black flies were readily observed swarming around and feeding on birds. A large number of these parasites were easily trapped on fly strips (Fig. 2). Multifocal to coalescing cutaneous hemorrhagic lesions, consistent with fly bites, were seen on the birds. Upon necropsy examination, a large number of black flies were also observed in the digestive tract (Fig. 3). Although black flies may cause disease directly, such as cardiopulmonary collapse and anaphylactoid reactions, detection of Leucocytozoon in blood smears (Fig. 4) of affected birds prompted further investigations of this protozoan as a cause of disease. Leucocytozoon spp. are known to be transmitted by black flies and may be associated with morbidity and mortality in birds such as poultry. From June 2009 through July 2012, the investigation included a total collection of 1068 individual blood samples, representing 371 individual premises in 89 counties/parishes across Mississippi 59, Alabama 10, Louisiana 4, and Tennessee 16. Of the 371 premises where blood samples were collected, 96 (26%) were either positive or highly suspected to be positive for Leucocytozoon spp. by blood smear analysis, and 5 (1.2%) were positive for Haemoproteus spp. by blood smear analysis. Attempts to diagnose Leucocytozoon spp. by PCR analysis and sequencing were complicated by coinfections with two closely related haemosporidians (Haemoproteus spp. and Plasmodium spp.). A novel technique involving flow cytometry was also explored. This study discusses the black fly field outbreak, the involvement of haemosporidians, molecular methods for detection of both the black flies and blood parasites, and initial attempts at flow cytometry.

Investigaciones sobre brotes de ataques de la mosca negra y de subsecuentes hemosporidios aviares en aves de traspatio y en otras especies aviares expuestas.

A finales de la primavera del 2009 y del 2010, se recibieron reportes de brotes severos de la mosca negra (Simulium spp., mostrado en Fig. 1) en varios condados del estado de Mississippi, especialmente en aquellos localizados alrededor del Delta del río Mississippi. Los reportes indicaban ataques de moscas negras en múltiples especies de aves de traspatio y que causaban gran morbilidad y mortalidad en las parvadas afectadas. En varios lugares afectados, se observaron fácilmente moscas negras pululando alrededor y alimentándose de las aves. Un gran número de estos parásitos quedaron atrapados fácilmente en tiras para atrapar moscas (Fig. 2). Se observaron en las aves lesiones cutáneas hemorrágicas de naturaleza multifocal a coalescente, características de las mordeduras de la mosca. Durante el examen de necropsia, también se observó un gran número de moscas negras en el tracto digestivo (Fig. 3). Aunque las moscas negras pueden causar enfermedad directamente, como colapso cardiopulmonar y reacciones anafilactoid

Unformulated oligodeoxynucleotides (ODN) containing CpG motifs (CpG-ODN) have been shown to stimulate the innate immune system against a variety of bacterial, viral, and protozoan infections in a variety of vertebrate species. We have previously shown that in ovo delivery of unformulated CpG-ODN was able to significantly protect neonatal broiler chickens against Escherichia coli or Salmonella Typhimurium infections. The objectives of this study were to examine the safety and immunoprotective effects of CpG-ODN formulated with 2 types of carbon nanotubes (CNTs) or 2 types of lipid-surfactant (LSC) delivery systems in neonatal broilers against E. coli septicemia. Embryonated eggs, which had been incubated for 18 days, received either 50 µg of CNT-CpG-ODN, 50 µg of LSC-CpG-ODN, 50 µg of unformulated CpG-ODN, or saline. Four days after exposure to CpG-ODN (day 1 posthatch), 1 × 10⁴ or 1 × 10⁵ colony-forming units of a virulent strain of E. coli isolated from a turkey with septicemia were inoculated subcutaneously in the neck. Clinical signs, pathology, bacterial isolations from the air sacs, and mortality were observed for 8 days following challenge with E. coli. Bacterial isolations and pathologic observations were conducted immediately after birds were dead or euthanatized. The survival rate of birds in groups receiving saline following E. coli infection was 20% to 30%. In contrast, birds receiving CpG-ODN formulations had a significantly higher survival rate of 60% to 80% (P < 0.01). Bacterial loads and clinical scores were significantly lower (P < 0.05) in groups treated with CNT- or LSC-CpG-ODN compared to the groups receiving CpG-ODN or saline. Moreover, there is no evidence of any adverse effects of these formulations in any organs or in growth rates of birds until 42 days of age. This is the first time that CpG-ODN formulated with CNT and LSC have been demonstrated to have an immunomodulatory effect against an E. coli infection in neonatal broiler chickens following in ovo delivery.

Protección temprana en pollos de engorde después de la aplicación in ovo de oligodesoxinucleótidos que contienen motivos CpG (CpG ODN) formulados con nanotubos de carbono o liposomas.

Se ha demostrado que los oligodesoxinucleótidos (ODN) no formulados que contienen motivos CpG (CpG-ODN) pueden estimular el sistema inmune innato contra una variedad de infecciones por protozoarios, bacterias y virus en una variedad de especies de vertebrados. Se ha demostrado previamente que la aplicación in ovo de CpG-ODN no formulados fue capaz de proteger significativamente a pollos de engorde contra infecciones tempranas por Escherichia coli o Salmonella typhimurium. Los objetivos de este estudio fueron examinar la inocuidad y los efectos inmunoprotectores de CpG-ODN formulados con 2 tipos de nanotubos de carbono (CNT) o dos tipos de sistemas de administración de lípidos surfactantes (LSC) en pollos recién nacidos contra la septicemia por E. coli. Los huevos embrionados, que habían sido incubados durante 18 días, recibieron o bien 50 µg de CNT-CpG-ODN, 50 µg de LSC-CpG-ODN, 50 µg de CpG-ODN no formulados, o solución salina. Cuatro días después de la exposición a los CpG-ODN (día 1 después de la eclosión), se inocularon con 1 × 10⁴ o 1 × 10⁵ unidades formadoras de colonias de una cepa virulenta de E. coli aislada de un pavo con septicemia por vía subcutánea en el cuello. Se analizaron los signos clínicos, patología, aislamiento bacterianos de los sacos aéreos, y la mortalidad durante ocho días después de la inoculación con E. coli. Los aislamientos bacterianos y las observaciones patológicas se llevaron a cabo inmediatamente después de que las aves murieron o se les practicó la eutanasia. La tasa de supervivencia de las aves

Necrotic enteritis (NE) is an important infectious disease in chickens. Predisposing factors play critical roles both in disease outbreaks in the field and in models for experimental induction of disease. Systematic manipulation and study of predisposing factors help to optimize methods for the experimental reproduction of disease. The nature of such factors may play a confounding role in challenge models and, therefore, warrant investigation to determine their importance in industry-relevant NE reproduction models. In the present study, we examined the roles of dietary fishmeal inclusion, Eimeria inoculation (E), and Clostridium perfringens challenge (C) on broiler growth performance and induction of NE infection. The results showed that E, preceding C, greatly increased the severity of NE induced in broiler chickens, but fishmeal addition played only a marginal role in the challenge model. Bird performance was significantly affected by all three factors during the 35-day experimental period. Fishmeal increased body weight, but statistically significant effects of fishmeal were not observed on feed conversion ratio (FCR) and feed intake. Both Eimeria and C. perfringens significantly reduced body weight gain and feed intake. E but not C led to significantly poorer FCR. These findings indicate that dietary fishmeal may be removed from the model to allow the performance results of challenged chicks to be equivalent to the performance of chicks in the field. In conclusion, the present study demonstrates that an NE challenge model without fishmeal is valid and removes bird performance bias in the model introduced by feeding high fishmeal diets, refining the model to facilitate the yield of more commercially relevant results.

Análisis multifactorial de la medida en que Eimeria y la harina de pescado predisponen a la enteritis necrótica en pollos de engorde.

La enteritis necrótica (NE) es una enfermedad infecciosa importante en pollos. Los factores predisponentes juegan un papel crítico tanto en los brotes de enfermedades en el campo y en los modelos para la inducción experimental de la enfermedad. La manipulación sistemática y el estudio de los factores predisponentes ayudan a optimizar los métodos para la reproducción experimental de la enfermedad. La naturaleza de tales factores puede jugar un papel de confusión en modelos de desafío y por lo tanto, justifican una investigación para determinar su importancia en los modelos de reproducción de la enteritis necrótica que son relevantes para la industria. En el presente estudio se analizaron los efectos de la inclusión de harina de pescado en la dieta, la inoculación de Eimeria (E) y el desafío con Clostridium perfringens (C) sobre el crecimiento de pollos de engorde y la inducción de la infección por enteritis necrótica. Los resultados mostraron que la inoculación con Eimeria antes del desafío con Clostridium, aumentó en gran medida la severidad de la enteritis necrótica inducida en pollos de engorde, pero la adición de harina de pescado jugó sólo un papel marginal en el modelo de desafío. El rendimiento de las aves fue significativamente afectado por los tres factores durante el período experimental de 35 días. La harina de pescado aumentó el peso corporal, pero los efectos estadísticamente significativos de la harina de pescado no se observaron en la conversión alimenticia (FCR) y ni en el consumo de alimento. Tanto Eimeria y C. perfringens redujeron significativamente la ganancia de peso corporal y el consumo de alimento. La inoculación de Eimeria pero no la inoculación con C. perfringens indujo significativamente una pobre conversión alimenticia. Estos hallazgos indican que la harina de pescado en la dieta puede ser removida del modelo para permitir que los resultados de rendimiento de los pollitos desafiados sean equivalentes a

The discovery of novel Clostridium perfringens toxins NetB and TpeL has initiated questions regarding their role in the pathogenesis of disease. However, data showing the prevalence of these genes in C. perfringens populations are limited to certain geographical areas. If netB and tpeL are important virulence factors for disease worldwide, one would expect to find these genes in isolates from other regions as well. To address this hypothesis, C. perfringens isolates collected from Alabama broiler farms over 15 yr ago were toxin genotyped using PCR. Each isolate was screened for netB and tpeL; the major lethal toxin genes cpa, cpb, etx, and ia; and the enterotoxin gene cpe. Results of the assay showed all isolates presumed to be C. perfringens were genotypically type A, cpe negative except for one broiler litter isolate, which was genotypically type C. Only two isolates were positive for netB. Similarly, only two isolates were positive for tpeL, one of which was also netB positive. The low incidence observed for netB and tpeL indicates that these genes are not significant virulence factors for the sampled population.

Baja Prevalencia de los genes netB y tpeL en aislamientos históricos de Clostridium perfringens de granjas de pollo de engorde en Alabama.

El descubrimiento de las nuevas toxinas NetB y TpeL de Clostridium perfringens ha iniciado preguntas con respecto a su papel en la patogénesis de la enfermedad. Sin embargo, los datos muestran que la prevalencia de estos genes en las poblaciones de C. perfringens se limitan a ciertas áreas geográficas. Si netB y tpeL son factores importantes de virulencia de la enfermedad en todo el mundo, se esperaría encontrar estos genes en los aislamientos de otras regiones también. Para evaluar esta hipótesis, se genotipificaron mediante PCR, los genes que codifican las toxinas de aislamientos de C. perfringens que fueron recolectados hace más de quince años atrás de granjas de pollo de engorde de Alabama. Cada cepa se analizó para netB y tpeL; los genes principales de toxinas letales cpa, cpb, etx, e ia y el gene cpe de la enterotoxina. Los resultados del ensayo mostraron que todos los presuntos aislamientos de C. perfringens eran genotípicamente del tipo A, negativos para cpe, con excepción de un aislamiento de la cama de una parvada de pollo de engorde, que era genotípicamente del tipo C. Sólo dos aislamientos fueron positivos para netB. Del mismo modo, sólo dos aislamientos fueron positivos para tpeL, uno de los cuales también fue netB positivo. La baja incidencia observada para netB y tpeL indica que estos genes no son factores de virulencia importantes en la población muestreada.

Salmonella enterica serovar Gallinarum causes fowl typhoid, recognized worldwide as an economically important disease. The current vaccine, 9R, lacks a complete O antigen, which is a Salmonella virulence factor, and, in addition, has a number of other less well characterized chromosomal mutations. For optimal efficacy, 9R is administered by injection. In an effort to develop a vaccine suitable for oral administration, we constructed Salmonella Gallinarum strains with a reversible O-antigen phenotype. In this scenario, the vaccine strain produces full-length O antigen at the time it is administered to birds. After the vaccine has had time to colonize internal lymphoid tissues, the O-antigen is gradually lost, resulting in an attenuated strain. We found that strains carrying single mutations conferring this phenotype, Δpmi and arabinose-regulated rfc, retained virulence. However, a mutant strain carrying both of these mutations was completely attenuated and immunogenic in chickens. This work demonstrates a novel approach for developing live Salmonella vaccines for poultry.

Una vacuna contra la tifoidea aviar mediante la producción de un antígeno O reversible.

La Salmonella enterica serovar Gallinarum causa la tifoidea aviar que es reconocida a nivel mundial como una enfermedad económicamente importante. La vacuna actual, 9R carece de un antígeno O completo, que es un factor de virulencia de Salmonella y además tiene varias mutaciones cromosómicas que no están completamente caracterizadas. Para obtener una eficacia óptima, la vacuna 9R se administra por inyección. En un esfuerzo por desarrollar una vacuna adecuada para la administración oral, se construyeron cepas de Salmonella Gallinarum con un antígeno O de fenotipo reversible. En este escenario, la cepa vacunal produce un antígeno O completo en el momento en que se administra a las aves. Después de que la vacuna ha tenido tiempo para colonizar los tejidos linfoides internos, el antígeno O se pierde gradualmente, lo que resulta en una cepa atenuada. Se ha encontrado que las cepas portadoras de mutaciones individuales que confieren este fenotipo, los genes Δpmi y rfc regulado por arabinosa, retuvieron su virulencia. Sin embargo, una cepa mutante que mostraba ambas mutaciones estaba completamente atenuada y era inmunogénica en los pollos. Este trabajo demuestra un nuevo enfoque para el desarrollo de vacunas vivas contra Salmonella en la avicultura.

Salmonellosis affects humans more frequently than any other foodborne disease, and it causes severe economic losses in the poultry industry. A cross-sectional study was carried out to estimate the prevalence of Salmonella spp. in laying hen farms in the Tolima region of Colombia. Fifteen egg-laying hen farms were sampled, and a total of 589 samples were cultured to isolate Salmonella spp. A total of 14 isolates of Salmonella spp. were recovered from five farms, resulting in a prevalence of 33.33% (95%, confidence interval  =  14%–53%) at the farm level. Salmonella spp. were recovered from eggshells (57.15%, n  =  8), feed (28.57%, n  =  4), and environmental samples (14.29%, n  =  2). Farm practices, such as the milling of feed (odds ratio [OR]  =  24) and the storage of eggs in the henhouses (OR  =  11.25), in addition to the feed type (OR  =  7.64) and the use of bamboo for construction of the facility (OR  =  5.24), were identified as risk factors for Salmonella spp. The 14 isolates were identified as Salmonella Enteritidis (n  =  6) and Salmonella Shannon (n  =  8), and both serovars were resistant to a number of antibiotics. Pulsed-field gel electrophoresis presented three different XbaI macrorestriction patterns. The Salmonella Enteritidis isolates all presented a single pattern, whereas the Salmonella Shannon isolates were grouped into two distinct patterns. The results indicate that Salmonella spp. could be recovered from various sources at laying hen farms, and eggshell contamination is a particular concern.

Caracterización de Salmonella de granjas comerciales de gallinas de postura en una región central de Colombia.

La salmonelosis afecta a los humanos con mayor frecuencia que cualquier otra enfermedad transmitida por alimentos y causa graves pérdidas económicas en la industria avícola. Se llevó a cabo un estudio transversal para estimar la prevalencia de Salmonella spp. en explotaciones de gallinas de postura en la región del Tolima en Colombia. Se muestrearon quince granjas de gallinas de postura y un total de 589 muestras fueron cultivadas para aislar Salmonella spp. Un total de 14 aislamientos de Salmonella spp. fueron recuperados de cinco granjas, resultando en una prevalencia del 33.33% (95%, intervalo de confianza  =  14%–53%) a nivel de granja. Se recuperó Salmonella spp. a partir de cascarones de huevo (57.15%, n  =  8), de alimento (28.57%, n  =  4) y de muestras ambientales (14.29%, n  =  2). Algunas prácticas, tales como la molienda del alimento (OR  =  24), el almacenamiento del huevo en las casetas avícolas (OR  =  11.25), el tipo de alimento (OR  =  7.64) y el uso del bambú para la construcción de las instalaciones (OR  =  5.24), fueron identificados como factores de riesgo para Salmonella spp. Las 14 cepas fueron identificadas como Salmonella Enteritidis (n  =  6) y Salmonella Shannon (n  =  8) y ambos serotipos fueron resistentes a varios antibióticos. La electroforesis en gel de campo con pulsaciones mostró tres patrones diferentes de macrorrestricción por la enzima XbaI. Todos los aislamientos de Salmonella Enteritidis mostraron un patrón único, mientras que los aislamientos de Salmonella Shannon se agruparon en dos patrones distintos. Los resultados indican que la Salmonella spp. pudo ser recuperada de varias fuentes en las granjas de gallinas de postura y la contaminación del cascarón es de especial preocupación.

Avian influenza (AI) viruses cause disease in domestic and wild bird species. Although these viruses have been reported to occur in poultry in Uganda, risk factors for their introduction and spread were largely unknown. We investigated the seroprevalence and risk factors for exposure of free-range poultry to AI viruses in Important Bird Areas (IBAs) in the country. A structured questionnaire was administered to 664 respondents, and 1342 sera were collected from poultry. Sera were analyzed for antibody titers against AI using competitive ELISA. AI antibody prevalence was 7.6% (95% confidence interval [CI]: 6.2–9.0) in the Lake Victoria Basin, 8.4% (95% CI: 7.0–9.8) in the southwestern region, and none (0/432) in the Kyoga region. High proportions of risky practices were observed among respondent farmers. Significant predictors for exposure of poultry to AI viruses were the source of restocking poultry, method of disposal of inedible parts of slaughtered poultry, and waterfowl visits to a nearby body of water. In addition, visits by waterbirds to a nearby body of water during October–December were more associated with exposure to AI viruses (odds ratio  =  3.6; 95% CI: 1.42–9.23) compared with January–March visits'. These results suggested the existence of several risk factors for exposure of free-range to AI viruses in IBAs in Uganda.

Seroprevalencia y factores de riesgo para la exposición al virus de la influenza aviar de aves mantenidas en semi-libertad en áreas avícolas importantes en Uganda.

Los virus de influenza aviar causan enfermedad en especies de aves domésticas y silvestres. Aunque se ha reportado que estos virus se presentan en aves de corral en Uganda, los factores de riesgo para su introducción y propagación son en gran parte desconocidos. Se investigaron los factores de riesgo y seroprevalencia para la exposición de las aves de corral al virus de influenza aviar en las áreas aviares importantes del país. Se aplicó un cuestionario estructurado a 664 encuestados, y se recolectaron 1342 muestras de suero de aves de corral. Se analizaron los sueros para evaluar los títulos de anticuerpos contra la influenza aviar utilizando un método competitivo de ELISA. La prevalencia de anticuerpos contra influenza aviar fue de 7.6% (Intervalo de confianza [IC] de 95%: 6.2 a 9.0) en la cuenca del lago Victoria. En la región suroeste fue del 8.4% (IC del 95%: 7.0 a 9.8) y de cero (0/432) en el región de Kyoga. Se observó altas frecuencia de prácticas de riesgo entre los agricultores encuestados. Los predictores significativos para la exposición de las aves a los virus de influenza aviar fueron la fuente de aves para repoblación, el método de eliminación de partes no comestibles de las aves sacrificadas y la visita de aves acuáticas a un cuerpo de agua cercano. Además, las visitas de las aves acuáticas a un cuerpo de agua cercano que ocurrieron durante octubre a diciembre estuvieron más asociadas con la exposición al virus de influenza aviar (razón de momios  =  3.6, IC 95%: 1.42 a 9.23) en comparación con las visitas ocurridas durante el periodo enero a marzo. Estos resultados sugieren la existencia de varios factores de riesgo para la exposición al virus de la influenza aviar de las aves mantenidas en condiciones de semi-libertad en Uganda.

Since late 2009, an unusual problem of reovirus-related lameness has been seen in market-age tom turkeys in the upper Midwest area of the United States. In this study, we determined the efficacy of five commonly used disinfectants (Virocid, Keno X5, Synergize, One Stroke, and Tek Trol) against turkey arthritis reoviruses (TARVs). For comparison, turkey enteric reovirus (TERV) and chicken arthritis reovirus (CARV) were also included. At their recommended concentrations, all five disinfectants were found to be effective virucidals, inactivating 99.99% of all viruses within 10 min. However, oxidizing agents and quaternary ammonium compounds aldehyde types of disinfectants were more effective, killing the viruses in a shorter time (2–5 min) than the other types of disinfectants. These results indicate that these disinfectants can be an effective tool in the control of these viruses.

Eficacia de cinco desinfectantes comúnmente utilizados contra reovirus que producen artritis en pavos.

Desde finales del 2009, se ha observado un problema poco común de cojeras relacionado con reovirus en los pavos machos a la edad de mercado en el área norte del Medio Oeste de los Estados Unidos. En este estudio, se determinó la eficacia de cinco desinfectantes de uso común (Virocid, Keno X5, Synergize, One Stroke y Tek Trol) contra reovirus que producen artritis en pavos (TARVs). Con fines de comparación, también se incluyeron reovirus entéricos de los pavos (TERV) y reovirus que producen artritis en el pollo (CARV). En sus concentraciones recomendadas, se encontró que los cinco desinfectantes fueron viricidas eficaces, inactivando el 99.99% de todos los virus en 10 minutos. Sin embargo, los agentes oxidantes y compuestos de amonio cuaternario desinfectantes del tipo de los aldehídos fueron más efectivos, matando los virus en un tiempo más corto (2–5 minutos) que los otros tipos de desinfectantes. Estos resultados indican que estos desinfectantes pueden ser una herramienta eficaz en el control de estos virus.

To prove the hypothesis that the physical form of diet affects the outcome of an artificial infection with Salmonella Enteritidis in broilers, 7-day-old birds were allotted to one of four groups and fed botanically, and nearly also chemically identical diets, differing in grinding and further compaction. In total, two birds from each group (age 14 days) were administered on average 1.06 × 10⁸ colony-forming units (CFU) of Salmonella Enteritidis directly into the crop by gavage and immediately put back as “seeder birds” into their respective groups. The salmonella status of each bird was analyzed by cloacal swabs, and at postmortem examination, cecal content and liver tissue samples were taken. Shedding (measured by cloacal swabs) was reduced significantly (P < 0.05) in groups offered the coarsely ground and pelleted diet and the diet including whole wheat compared with the groups fed the finely ground and pelleted and the coarsely ground and extruded diet. Nevertheless, only broilers fed the diet containing whole wheat showed a significantly (P < 0.05) lower frequency of Salmonella Enteritidis isolation in the cecal content and liver tissue. This diet was characterized by the highest percentage of particles >2 mm. In this study the physical form of diet affected the outcome of an artificial infection with Salmonella Enteritidis significantly.

Efectos de la forma física de la dieta en la infección artificial por Salmonella en pollos de engorde.

Para probar la hipótesis de que la forma física de la dieta afecta el resultado de una infección artificial con Salmonella Enteritidis en pollos de engorde, aves de siete días de edad fueron asignadas en uno de cuatro grupos alimentados con dietas botánicamente idénticas y casi idénticas químicamente, con diferencias en la molienda y compactación posterior. En total, a dos aves de cada grupo (con edad de 14 días) se les administró una media de 1.06 × 10⁸ unidades formadoras de colonias (UFC) de Salmonella Enteritidis (SE) directamente en el ingluvíes a través de una sonda y de inmediato se introdujeron como “aves sembradoras” en su grupos respectivos. La condición con relación a salmonella de cada ave se analizó mediante hisopos cloacales y durante el examen post mortem se tomaron el contenido cecal y muestras de tejido del hígado. La eliminación (determinada mediante hisopos de cloaca) se redujo significativamente (P <0.05) en los grupos a los que se les ofreció la dieta con molido grueso y peletizada y la dieta incluyendo trigo entero en comparación con los grupos alimentados con la dieta con molienda fina y peletizada y con la dieta con molienda gruesa y extruida. Sin embargo, sólo los pollos alimentados con la dieta que contenía trigo entero mostraron una frecuencia significativamente (P <0.05) inferior de aislamiento de Salmonella Enteritidis en el contenido cecal y en el tejido hepático. Esta dieta se caracterizó por el alto porcentaje de partículas mayores a 2 mm. En este estudio la forma física de la dieta influyó significativamente en el resultado de una infección artificial con Salmonella Enteritidis.

Infectious diseases such as aspergillosis, avian malaria, and viral infections are significant threats to the conservation of penguins, leading to morbidity and mortality of these birds both in captivity and in the wild. The immune response to such infectious diseases is dependent on different mechanisms mediated by cells and soluble components such as antibodies. Antibodies or immunoglobulins are glycoproteins that have many structural and functional features that mediate distinct effector immune functions. Three distinct classes of antibodies have been identified in birds: immunoglobulin A (IgA), immunoglobulin M (IgM), and immunoglobulin Y (IgY). In this study we aim to establish an efficient laboratory method to obtain IgM and IgY antibodies from plasma samples of healthy adult Magellanic penguins (Spheniscus magellanicus). The protocol was developed combining plasma delipidation, sequential precipitation with caprylic acid and ammonium sulfate, and size-exclusion chromatography. The efficiency of the protocol and the identity of the purified IgM and IgY antibodies were confirmed through enzyme-linked immunosorbent assay, Western blotting, one-dimensional and two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis, and lectin binding assay. Structural and physicochemical properties of IgM and IgY from Magellanic penguins were consistent with those of other avian species. This purification protocol will allow for more detailed studies on the humoral immunity of penguins and for the development of high specificity serologic assays to test Magellanic penguins for infectious pathogens.

Aislamiento y caracterización de anticuerpos del tipo IgM e IgY del plasma de pingüinos de Magallanes (Spheniscus magellanicus).

Las enfermedades infecciosas, como la aspergilosis, la malaria aviar, y las infecciones virales son amenazas significativas a la conservación de los pingüinos y provocan morbilidad y mortalidad de estas aves, tanto en cautiverio como en vida silvestre. La respuesta inmune a este tipo de enfermedades infecciosas depende de diferentes mecanismos mediados por células y componentes solubles, tales como anticuerpos. Los anticuerpos o inmunoglobulinas son glicoproteínas que tienen muchas características estructurales y funcionales que median diferentes funciones inmunes efectoras. Tres clases distintas de anticuerpos se han identificado en las aves: inmunoglobulina A (IgA), inmunoglobulina M (IgM) e inmunoglobulina Y (IgY). En este estudio se pretende establecer un método de laboratorio eficiente para obtener anticuerpos IgM e IgY de muestras de plasma de pingüinos de Magallanes (Spheniscus magellanicus) adultos sanos. El protocolo fue desarrollado combinando la eliminación de lípidos del plasma, la precipitación secuencial con ácido caprílico y sulfato de amonio y por cromatografía de exclusión por tamaño. La eficacia del protocolo y la identidad de los anticuerpos IgM e IgY purificados fue confirmada a través de pruebas de inmunoensayo con enzimas ligadas, por inmunoelectrotransferencia, mediante electroforesis en geles de poliacrilamida unidimensionales y bidimensionales y por el ensayo de unión a la lectina. Las propiedades estructurales y fisicoquímicas de las inmunoglobulinas IgM e IgY de los pingüinos de Magallanes fueron consistentes con las de otras especies aviares. Este protocolo de purificación permitirá estudios más detallados sobre la inmunidad humoral de pingüinos y para el desarrollo de ensayos serológicos de alta especificidad para el análisis de los pingüinos de Magallanes para la detección de agentes patógenos infecciosos.

Avibacterium paragallinarum is the causative agent of infectious coryza, an important respiratory disease of chickens. The capsule is an important virulence determinant of many pathogenic bacteria, but the function of the capsule in Av. paragallinarum is not well defined. In this study, acapsular mutants of Av. paragallinarum were constructed by inactivation of the hctA gene using the TargeTron® gene knockout system. The acapsular mutants were found to have greater hemagglutination activity than did the wild-type strain. Further, acapsular mutants exhibited an increased ability to adhere to DF-1 cells and to form biofilms on abiotic surfaces. Virulence assays showed that acapsular mutants were less virulent than the wild-type strain. Taken together, these results indicated that loss of capsule increases hemagglutination and adhesion activities but decreases the virulence of Av. paragallinarum. These results could be valuable to further elucidate the function of the capsule and the mechanism of pathogenicity of Av. paragallinarum.

La pérdida de la cápsula aumenta la actividad adherente pero disminuye la virulencia de Avibacterium paragallinarum.

Avibacterium paragallinarum es el agente causante de la coriza infecciosa, que es una enfermedad respiratoria importante de los pollos. La cápsula es un importante determinante de virulencia de muchas bacterias patógenas, pero la función de la cápsula en A. paragallinarum no está bien definida. En este estudio, se construyeron mutantes sin cápsula de A. paragallinarum mediante la inactivación del gene hctA utilizando el sistema de bloqueo de genes TargeTron®. Se encontró que los mutantes sin cápsula mostraban una mayor actividad de hemoaglutinación en comparación con la cepa tipo silvestre. Además, los mutantes sin cápsula mostraron una mayor capacidad para adherirse a las células DF-1 y para formar biopelículas en superficies abióticas. Los ensayos de virulencia mostraron que los mutantes sin cápsula eran menos virulentos que la cepa de tipo silvestre. En conjunto, estos resultados indicaron que la pérdida de la cápsula aumenta las actividades de hemaglutinación y de adhesión, pero disminuye la virulencia de A. paragallinarum. Estos resultados podrían ser valiosos para elucidar la función de la cápsula y el mecanismo de patogenicidad de A. paragallinarum.

Marek's disease virus (MDV) is an oncogenic herpesvirus that afflicts chickens with the disease known as Marek's disease (MD). This virus induces tumors, nerve lesions, immunosuppression, and death of affected birds. Vaccines are the primary control method for MD but, due to the periodic evolution of field strains, it is necessary to explore the development of new MD vaccines. MD vaccines are often attenuated MDV strains generated through serial passage in vitro. We previously used experimental evolution of MDV to provide a better understanding of the genetic basis of attenuation. During complete genome sequencing of evolved MDV populations, we identified a point mutation within the UL5 helicase-primase gene and created a UL5 recombinant virus that significantly reduced disease incidence by 89%–100%. To determine if experimental evolution also identifies mutations that provide protective qualities as potential vaccine candidates, we tested the UL5 recombinant virus as a vaccine and compared its protection to commercial herpesvirus of turkey (HVT) and bivalent (HVT SB-1) vaccines. Both commercial vaccines resulted in higher protection against MD than did the UL5 recombinant virus, although the UL5 virus did provide protection against developing MD in 46%–70% of birds challenged. This indicates that a mutation within the UL5 helicase-primase gene not only reduces virulence but also confers protection against challenge with virulent MDV, providing support that not only can experimental evolution identify candidate mutations involved in attenuation but can also identify potential candidates for use in vaccine development.

El virus de la enfermedad de Marek Mut UL5-I682R que posee una mutación de un solo nucleótido dentro del gene de la subunidad helicasa-primasa no sólo reduce la virulencia sino que también proporciona protección vacunal parcial contra la enfermedad de Marek.

El virus de la enfermedad de Marek (MDV) es un herpesvirus oncogénico que afecta a pollos produciendo la enfermedad conocida como la enfermedad de Marek (MD). Este virus induce tumores, lesiones nerviosas, inmunodepresión y muerte de las aves afectadas. Las vacunas son el método de control principal para la enfermedad de Marek pero debido a la evolución periódica de las cepas de campo, es necesario explorar el desarrollo de nuevas vacunas contra esta enfermedad. Las vacunas de Marek son a menudo cepas atenuadas del virus generadas a través de pasajes seriados in vitro. Previamente, se ha utilizado la evolución experimental del virus de Marek para proporcionar una mejor comprensión de las base genéticas de la atenuación. Durante la secuenciación completa del genoma de las poblaciones evolutivas del virus, se ha identificado una mutación puntual dentro del gene helicasa-primasa UL5 y se creó un virus recombinante en el gene UL5 que mostró una reducción significativa de la incidencia de la enfermedad en un 89% a 100%. Para determinar si la evolución experimental también identifica las mutaciones que proporcionan cualidades protectoras como posibles candidatos para vacunas, se probó el virus recombinante UL5 como vacuna y se comparó su protección con relación a vacunas comerciales con herpesvirus de pavo (HVT) y bivalentes (HVT SB-1). Ambas vacunas comerciales resultaron en una mayor protección contra la enfermedad de Marek en comparación con el virus recombinante UL5, aunque el virus UL5 proporcionó protección contra el desarrollo de la enfermedad de Marek entre 46% a 70% de las aves desafiadas. Esto indica que una mutación en el gene de la helicasa-primasa de UL5 no sólo reduce la virulencia sino que también confiere protección contra el desafío con el virus de Marek virulento, proporcionando apoyo de que con la evolución experimental no solo se pueden identificar mutaciones candidatas implicadas en la atenuación, sino que también se pueden identificar posibles candidatos para su us

The use of live oocyst vaccines is becoming increasingly important in the control of avian coccidiosis in broilers. Knowledge of the mechanisms employed when chicks uptake oocysts and become immune is important for optimizing delivery of live vaccines. The current study tests the hypothesis that chicks not initially immunized may ingest oocysts by contact with litter containing oocysts shed by immunized cohorts. In Experiment 1, day-old broiler chicks were housed in pens containing clean litter. In Trial 1, 100% of chicks in some pens were immunized with 2.5 × 10³ Eimeria acervulina oocysts while in other pens only 75% of chicks were immunized and remaining cohorts within the pens were not immunized. Other pens contained chicks that served as nonimmunized nonchallenged controls or nonimmunized challenged controls (NIC). On day 21, birds were given a homologous challenge of 6 × 10⁵ oocysts. A second identical trial was conducted, except birds were immunized with 500 Eimeria maxima oocysts and were challenged with 3 × 10³ E. maxima oocysts. In Experiment 2, 100% of chicks in some pens were immunized with 500 E. acervulina oocysts while in other pens either 75% or 50% of the birds were immunized. On day 14, birds were challenged with 1 × 10⁶ oocysts. Trial 2 was identical to Trial 1 except that birds were immunized with 100 E. maxima oocysts and challenged with 1 × 10⁶ oocysts. For all experiments weight gain, feed conversion ratio (FCR), plasma carotenoids, and litter oocyst counts were measured. In Experiment 1, the level of protection in groups containing 25% nonimmunized cohorts, as measured by weight gain, carotenoid level, FCR, and oocyst litter counts, was identical to groups containing 100% immunized chicks. In Experiment 2, pens where 50% or 75% of birds were immunized with either E. maxima or E. acervulina were not well protected from decreases in weight gain and plasma carotenoids nor from increases in litter oocyst counts following a challenge infection administered on day 14 relative to NIC. In addition, pens of birds where 100% of chicks were immunized were not well protected compared to NIC, and resistance to coccidiosis infection in immunized chicks was less than resistance in chicks challenged at 21 days. These results in total suggest that, when birds are challenged after 21 days, cohorts are protected from detrimental effects of challenge infection. However, when challenge infection is given at 14 days, cohorts are not well protected. The results support a conclusion that protection to coccidiosis is conveyed to cohorts by contact with oocysts shed into the litter by immunized chicks, but this resistance may take 14 days to develop.

Protección en pollos de engorde alojados con cohortes inmunizados contra Eimeria maxima y E. acervulina.

El uso de vacunas con ooquistes vivos es cada vez más importante en el control de la coccidiosis aviar en pollos de engorde. El conocimiento de los mecanismos empleados cuando los pollos ingieren los ooquistes y adquieren inmunidad es importante para optimizar los métodos de aplicación de vacunas vivas. El presente estudio pone a prueba la hipótesis de que pollos no inmunizados previamente pueden ingerir ooquistes mediante el contacto con cama con ooquistes eliminados por pollos cohortes inmunizados. En el experimento 1, pollos de engorde de un día fueron alojados en corrales que contenían cama limpia. En el Ensayo 1, el 100% de los pollos en algunos de los corrales fueron inmunizados con 2.5 × 10³ ooquistes de Eimeria acervulina, mientras que en otros corrales se inmunizó sólo al 75% de los pollos y el resto de cohortes dentro de los corrales no fueron inmunizados. Otros corrales contenían pollos que sirvieron como controles no inmunizados y no desafiados, o como controles no inmuniz

The population structure of an embryo-attenuated infectious bronchitis virus (IBV) Arkansas (Ark) Delmarva Poultry Industry (DPI)-derived vaccine was characterized during serial passages in chicken embryo kidney (CEK) cells and after back-passage in embryonated chicken eggs (ECE) and in chickens. Both conventional and deep-sequencing results consistently showed population changes occurred during adaptation to CEK cells. Specifically, 13 amino acid (aa) positions seemed to be targets of selection when comparing the vaccine genome prior to and after seven passages in CEK (CEKp7). Amino acid changes occurred at four positions in the spike (S) gene and, at two positions in the S gene, large shifts in frequencies of aa encoding were observed. CEK adaptation shifted the virus population towards homogeneity in S. The changes achieved in the S1 gene in CEKp7 were maintained after a back-passage in ECE. Outside the S gene, aa changes at three positions and large shifts in frequencies at four positions were observed. Synonymous nucleotide changes and changes in noncoding regions of the genome were observed at eight genome positions. Inoculation of early CEK passages into chickens induced higher antibody levels and CEKp4 induced increased respiratory signs compared to CEKp7. From an applied perspective, the fact that CEK adaptation of embryo-attenuated Ark vaccines reduces population heterogeneity, and that changes do not revert after one replication cycle in ECE or in chickens, provides an opportunity to improve commercial ArkDPI-derived vaccines.

Efectos de la adaptación de una vacuna atenuada de la bronquitis infecciosa serotipo Arkansas en células embrionarias de riñón.

La estructura de la población de una vacuna de la bronquitis infecciosa serotipo Arkansas (Ark) Industria Avícola de Delmarva (DPI) atenuada en embrión de pollo se caracterizó durante pasajes seriados en células renales de embrión de pollo (CEK) y por pasajes regresivos en huevos embrionados de pollo (ECE) y en pollos. Los resultados de la secuenciación convencional y profunda mostraron consistentemente cambios poblacionales ocurridos durante la adaptación a las células renales embrionarias. De manera específica, 13 posiciones de aminoácidos parecieron ser los objetivos de selección al comparar el genoma de la vacuna antes y después de siete pasajes en células renales embrionarias (CEKp7). Los cambios de aminoácidos se produjeron en cuatro posiciones en el gene de la espícula (S) y en dos posiciones en el gene S, se observaron grandes cambios en las frecuencias de codificación de aminoácidos. La adaptación en las células renales embrionarias cambió la población de virus a la homogeneidad en el gene S. Se mantuvieron los cambios logrados en el gen S1 en el pasaje siete CEKp7 después de un pasaje regresivo en embriones de pollo. Fuera del gene S, no se observaron cambios en aminoácidos en tres posiciones y se observaron cambios importantes en las frecuencias en cuatro posiciones. Se observaron cambios sinónimos de nucleótidos y cambios en las regiones codificantes del genoma en ocho posiciones del genoma. La inoculación en pollos de los pasajes iniciales en células renales embrionarias indujo niveles más altos de anticuerpos y el pasaje 4 (CEKp4) indujo aumento en los signos respiratorios en comparación con el pasaje siete (CEKp7). Desde una perspectiva aplicada, el hecho de que la adaptación en células renales de embrionarias de pollo de vacunas serotipo Arkansas atenuadas en embriones de pollo reduce la heterogeneidad de la población y dado que los cambios no revierten después de un ciclo de replicación en embriones de pollo o en pollos, se ofrece una oportunidad para mejorar las vacunas comerciales derivadas del serotipo Arkansas DPI.

Infectious bursal disease (IBD) is a highly contagious disease in young chickens which can result in high morbidity and mortality and also in great economic losses. The main target for the virus is the lymphoid tissue with a special predilection for the bursa of Fabricius. Several vaccines are available to control the disease. Intermediate plus vaccines are used in chickens with high maternal antibody titers which face high infection pressure. An example of an intermediate plus vaccine is a live vaccine based on IBD strain V877. The results of an efficacy study in commercial broilers with different levels of maternally derived antibodies (MDA) showed that the V877-based IBD vaccine can break through maternal antibody titers of higher than 1100 as determined by an IBD ELISA. The safety of the vaccine was demonstrated in a study in which specific-pathogen-free (SPF) chickens were vaccinated with a tenfold dose of the vaccine strain and a tenfold dose of the vaccine strain after five back passages in SPF chickens. The vaccine virus caused lesions, as could be expected for an intermediate plus vaccine, but the scores were not much higher than the maximal scores allowed for mild IBD vaccines in the European Pharmacopoeia, and reversion to virulence was absent. In studies in SPF chickens, there were no negative impacts by the IBD V877 vaccine on the efficacy of a live QX-like IB vaccine and a live Newcastle disease La Sota vaccine in vaccination challenge studies, although the IBD vaccine had a negative effect on the antibody response generated by the QX-like IB vaccine. It is concluded that the IBD V877 vaccine has the capacity to break through high levels of MDA, has a satisfactory safety profile, and interactions with other live vaccines are limited. In order to limit bursal lesions after vaccination it is recommended to confirm the presence of MDA before vaccinating with the V877 vaccine.

Eficacia, seguridad, e interacciones de una vacuna viva contra el virus de la enfermedad infecciosa de la bolsa de Fabricio elaborada a partir de la cepa V877 aplicada en pollos.

La enfermedad infecciosa de la bolsa es una enfermedad altamente contagiosa de pollos jóvenes que puede resultar en una alta morbilidad y mortalidad, así como en grandes pérdidas económicas. El blanco principal de este virus es el tejido linfoide, con especial predilección por la bolsa de Fabricio. Existen varias vacunas para controlar la enfermedad. Las vacunas intermedias plus se utilizan en pollos con altos títulos de anticuerpos maternos que se enfrentan a alta presión de infección. Un ejemplo de vacunas intermedias plus es una vacuna viva elaborada a partir de la cepa V877. Los resultados de un estudio de eficacia en pollos de engorde comerciales con diferentes niveles de anticuerpos de origen materno (MDA) mostraron que la vacuna elaborada con la cepa V877 puede traspasar los títulos de anticuerpos maternales mayores de 1100 según lo determinado por un método de ELISA para Gumboro. La seguridad de la vacuna se demostró en un estudio en el que pollos libres de patógenos específicos fueron vacunados con una dosis diez veces mayor de esta cepa vacunal y con una dosis diez veces de la cepa vacunal después de cinco pasajes en pollos libres de patógenos específicos. El virus vacunal causó lesiones, como era de esperarse para una vacuna intermedia plus, pero las puntuaciones no fueron mucho más altas que las puntuaciones máximas permitidas para las vacunas suaves en la Farmacopea Europea, y la reversión a la virulencia resultó ausente. En estudios en pollos libres de patógenos específicos, no hubo impacto negativo por la cepa vacunal V877 sobre la eficacia de una vacuna contra bronquitis infecciosa similar a la cepa QX y con una vacuna viva contra la enfermedad de Newcastle, cepa La Sota durante estudios de vacunación y desafío, aunque la vacuna de Gumboro tuvo un efecto negativo en el respuesta de anticuerpo

Over the last five decades, the pathogenicity of the Marek's disease virus (MDV) has evolved from the relatively mild strains (mMDV) observed in the 1960s to the more severe very-virulent-plus strains currently observed in today's outbreaks. The use of vaccines to control Marek's disease (MD), but not the infection cycle, is thought to be the major influence on the evolution of MDV. Selection for genetic resistance to MD has also been employed by the industry to control MD in the commercial setting but the role of host genetics on the evolution of MDV has been difficult to investigate in the field. To investigate the influence of vaccination and host resistance we developed a laboratory model to control and assess the effects of virus and animal genetics on MDV evolution. A bacterial artificial chromosome–derived MDV (Md5B40BAC) was used for in vivo passage (IVP) through turkey herpesvirus (HVT)-vaccinated resistant (MHC-B21) and susceptible (MHC-B13) genetic chicken lines. During IVP in the vaccinated susceptible line, the disease incidence increased from 23% MD in the first IVP to 53% MD during the fifth IVP. In the vaccinated resistant line, disease incidence increased from 0% MD during the first IVP to 29% MD during the fifth IVP. Although the IVP isolates remained relatively mild in the vaccinated resistant chicken line (29% MD) they increased from 0% to 63% MD when used to challenge the vaccinated susceptible chickens. There was no corresponding increase in disease incidence when the virus passed in the vaccinated susceptible genetic line was used to challenge the vaccinated resistant line. From this series of experiments we show that a cloned MDV (Md5B40BAC) can be selected by serial IVP to induce greater disease incidence in vaccinated chickens. This increase in disease incidence occurs in both susceptible and resistant chicken lines but is more easily observed in the susceptible line. Not surprisingly, both host genetics and vaccination play a role in selecting for increased MDV virulence. Our results suggest that the progressive increase in MDV virulence is partially masked as it circulates through vaccinated resistant genetic lines, but by applying this virus to less-resistant genetic lines, virus evolution can be clearly observed. We would predict that the introduction of more-resistant genetic lines into a commercial house contaminated with MDV circulating through susceptible lines would be less likely to produce vaccine breaks than placing susceptible lines into a house in which previously the MDV was circulating through resistant genetic lines.

La influencia del complejo mayor de histocompatibilidad y la vacunación con herpesvirus de los pavos sobre la evolución de la enfermedad del virus de Marek.

Durante las últimas cinco décadas, la patogenicidad del virus de la enfermedad de Marek (MDV) ha evolucionado desde las cepas relativamente leves (mMDV) observadas en la década de los 1960s, hasta las cepas más severas como las muy virulentas-plus (vv MDV) que actualmente se observan en los brotes actuales. Se cree que el uso de vacunas para el control de la enfermedad de Marek (MD) y no el ciclo de infección tiene la influencia mayor sobre la evolución del virus de Marek. La selección para la resistencia genética contra la enfermedad de Marek también ha sido empleada por la industria para controlar la enfermedad en el entorno comercial, pero ha sido difícil la investigación del papel de la genética del huésped en la evolución del virus de Marek en el campo. Para investigar la influencia de la vacunación y de la resistencia del hospedador, se desarrolló un modelo de laboratorio para controlar y evaluar los efectos de la genética de virus y animales sobre la evolución del virus de Marek. Se utilizó un virus de Marek derivado de un cromosoma bacteriano artificial (Md5B40BAC) para el pasaje en vivo (IVP) a través de líneas genéticas de pollos resistente

Ornithobacterium rhinotracheale is a rod-shaped, gram-negative, and mostly oxidase-positive bacterium that causes respiratory infections in chickens and turkeys worldwide and can also spread to nonrespiratory organs. The present report analyzes 294 cases in which O. rhinotracheale was isolated from turkeys or chickens in central California in the years 2000 through 2012. Two hundred sixteen cases were from turkey flocks and 78 from chicken flocks. The median age of turkey flocks was 8.7 wk; the median age of chicken flocks was 6.4 wk. From turkeys, O. rhinotracheale was more often isolated from August to January than during the rest of the year. Chickens cases were more evenly distributed throughout the year. The organs with the highest isolation rate were the infraorbital sinus and trachea, followed by lungs and air sacs. Isolation from other organs was rare. Pure cultures were obtained from relatively more turkey organs than chicken organs. The organ from which there was the highest chance to obtain a pure culture was the air sac. In 108 turkey flocks (50.0%) and 64 chicken flocks (82.1%) at least one other respiratory pathogen was detected. The most common gross lesions were increased mucus in trachea, caseous or fibrinous exudate in the air sacs, consolidated lungs indicating pneumonia, congested and edematous lungs, and a flattened trachea. For most types of lesions, the percentage of affected turkeys was higher than the percentage of affected chickens. The percentage of birds with lesions was higher if other respiratory pathogens were present. Overall, the host species (turkey or chicken) was a more important factor for the prevalence of most lesions than the detection of other respiratory pathogens. The most common histopathologic lesions in the sinus and trachea were heterophilic or mononuclear inflammatory cell infiltration. In the lungs and air sacs, the inflammation was characterized by heterophilic infiltration and/or fibrin accumulation. These results are helpful in selecting the most appropriate samples for isolation of O. rhinotracheale. In addition, they show the incidence of the bacterium in turkeys and chickens and which lesions can be expected after infection with O. rhinotracheale, and they indicate that in some cases O. rhinotracheale can be the primary, or at least the major, pathogen.

Estudio retrospectivo de aislamientos de Ornithobacterium rhinotracheale de pollos y de pavos en el centro de California: 294 casos (2000–12).

Ornithobacterium rhinotracheale es una bacteria bacilo Gram negativo y principalmente oxidasa positivo que causa infecciones respiratorias en pollos y en pavos en todo el mundo y también puede extenderse a órganos no respiratorios. El presente informe analiza 294 casos en los que O. rhinotracheale fue aislado de pavos o pollos en el centro de California entre los años 2000 al 2012. Doscientos dieciséis casos fueron de parvadas de pavos y 78 casos fueron procedentes de pollos. La edad media de las parvadas de pavos fue de 8.7 semanas; la edad media de los lotes de pollos fue de 6.4 semanas. En los pavos, O. rhinotracheale fue más frecuentemente aislado de agosto a enero en comparación con el resto del año. Los casos de pollos casos fueron distribuidos de manera más uniforme a lo largo del año. Los órganos con la tasa más alta de aislamiento fueron los senos infraorbitarios y la tráquea, seguida de pulmones y sacos aéreos. El aislamiento de otros órganos fue muy poco frecuente. Los cultivos puros se obtuvieron relativamente más frecuentemente de órganos de pavo en comparación que de los órganos de pollo. El órgano que mostró la posibilidad más alta de obtener cultivo puro fue de los sacos aéreos. En 108 parvadas de pavos (50.0%) y 64 parvadas de pollos (82.1%) se detectó al menos otro patógeno respiratorio. Las lesiones macroscópicas más comunes fueron

Previous research into the viral community in the poultry gastrointestinal tract has revealed a number of novel and partially described enteric viruses. It is evident that the poultry gut viral community remains minimally characterized and incompletely understood. Investigations into the microbiome of the poultry gut have provided some insight into the geographical distribution and the rapidly evolving taxonomy of the avian enteric picornaviruses. The present investigation was undertaken to produce a comparative metagenomic analysis of the gut virome from a healthy turkey flock versus a flock placed in the field. This investigation revealed a number of enteric picornavirus sequences that were present in the commercial birds in the field that were completely absent in the healthy flock. A novel molecular diagnostic assay was used to track the shedding of field strains of turkey enteric picornavirus in commercial poults inoculated with picornavirus-positive intestinal homogenates prepared from turkeys that were experiencing moderate enteric disease. The propagation of this novel enteric picornavirus in commercial poults resulted in significant reduction in weight gain, and suggests that this common inhabitant of the turkey gut may result in performance problems or enteric disease in the field.

Investigaciones sobre picornavirus entéricos de los pavos y su asociación con enfermedad entérica en pavipollos.

Las investigaciones anteriores acerca de la comunidad viral en el tracto gastrointestinal de las aves comerciales han revelado una serie de virus entéricos nuevos y parcialmente descritos. Es evidente que la comunidad viral en el intestino de las aves comerciales permanece mínimamente caracterizada y no se comprende completamente. Las investigaciones sobre el microbioma del intestino de las aves comerciales han proporcionado alguna información sobre la distribución geográfica y la taxonomía que está evolucionando rápidamente de los picornavirus entéricos aviares. Se llevó a cabo la presente investigación para producir un análisis comparativo de la metagenómica del viroma intestinal de una parvada sana contra una parvada colocada en el campo. Esta investigación reveló una serie de secuencias de picornavirus entéricos que estaban presentes en las aves comerciales en el campo y que estaban completamente ausentes en la parvada sana. Un nuevo ensayo de diagnóstico molecular se utiliza para seguir la diseminación de cepas de campo de picornavirus entéricos en pavipollos comerciales inoculados con homogeneizados intestinales positivos a la presencia de picornavirus preparados a partir de pavos que estaban experimentando enfermedades entéricas moderadas. La propagación de estos nuevos picornavirus entéricos en pavipollos comerciales resultó en una reducción significativa en la ganancia de peso y sugiere que este habitante común del intestino del pavo puede dar lugar a problemas de rendimiento o enfermedad entérica en el campo.

Between 2010 and 2011, 145 Enterococcus isolates (Enterococcus faecalis, n  =  127; Enterococcus faecium, n  =  18) were collected during routine bacteriologic diagnostics from broilers, layers, and fattening turkeys in Germany showing various clinical signs. The susceptibility to 24 antimicrobial agents was investigated by broth microdilution test to determine minimum inhibitory concentrations (MICs). All E. faecalis isolates (n  =  127) were susceptible to the beta-lactam antibiotics ampicillin, amoxicillin-clavulanic acid, and penicillin. Corresponding MIC with 50% inhibition (MIC₅₀) and MIC with 90% inhibition (MIC₉₀) values of these antimicrobial agents were at the lower end of the test range (≤4 µg/ml). In addition, no vancomycin-resistant enterococci (VRE) were found. High resistance rates were identified in both Enterococcus species for lincomycin (72%–99%) and tetracycline (67%–82%). Half or more than half of Enterococcus isolates were resistant to gentamicin (54%–72%) and the macrolide antibiotics erythromycin (44%–61%) and tylosin-tartate (44%–56%). Enterococcus faecalis isolated from fattening turkeys showed the highest prevalence of antimicrobial resistance compared to other poultry production systems. Eighty-nine out of 145 Enterococcus isolates were resistant to three or more antimicrobial classes. Again, turkeys stood out with 42 (81%) multiresistant isolates. The most-frequent resistance patterns of E. faecalis were gentamicin, lincomycin, and tetracycline in all poultry production systems.

Patrones de susceptibilidad antimicrobiana de Enterococcus faecalis y Enterococcus faecium aislados en parvadas avícolas en Alemania.

Entre los años 2010 y 2011, 145 aislamientos de Enterococcus (Enterococcus faecalis, n  =  127 y de Enterococcus faecium, n  =  18) se recolectaron durante el diagnóstico bacteriológico de rutina en pollos de engorde, gallinas de postura y pavos de engorde en Alemania que mostraron diferentes signologías clínicas. Se investigó la susceptibilidad contra 24 agentes antimicrobianos mediante la prueba de microdilución en caldo para determinar las concentraciones mínimas inhibitorias (con las siglas en inglés MIC). Todos los aislamientos de E. faecalis (n  =  127) fueron sensibles a los antibióticos beta-lactámicos, ampicilina, amoxicilina-ácido clavulánico y penicilina. Los valores correspondientes con concentraciones mínimas inhibitorias de 50% (MIC₅₀) y de 90% (MIC₉₀) para estos agentes antimicrobianos se encontraron en el extremo inferior de la prueba de rango (≤4 µg / ml). Además, no se encontraron enterococos resistentes a la vancomicina (VRE). Tasas altas de resistencia fueron identificadas para ambas especies de Enterococcus para la lincomicina (72%–99%) y tetraciclina (67%–82%). La mitad o más de la mitad de los aislamientos de Enterococcus fueron resistentes a la gentamicina (54%–72%) y a los antibióticos macrólidos como eritromicina (44%–61%) y tartrato de tilosina (44%–56%). Los aislamientos de Enterococcus faecalis de pavos de engorde mostraron la mayor prevalencia a la resistencia antimicrobiana en comparación con los aislamientos de otros sistemas de producción avícola. Ochenta y nueve de 145 aislamientos de Enterococcus fueron resistentes a tres o más clases de antimicrobianos. Una vez más, los pavos sobresalieron con 42 (81%) cepas multirresistentes. Los patrones de resistencia más frecuentes de E. faecalis fueron para la gentamicina, lincomicina y tetraciclina en todos los sistemas de producción avícola.

Previous studies in our laboratory showed that the Arkansas–Delmarva Poultry Industry (Ark-DPI) vaccine given to 1-day-old chickens by hatchery spray cabinet replicated poorly and failed to adequately protect broilers against homologous virus challenge, whereas the same vaccine given by eye-drop did replicate and the birds were protected following homologous virus challenge. To determine if mechanical damage following spray application plays a role in failure of the Ark-DPI vaccine, we examined the morphology of three Ark-DPI vaccines from different manufacturers using an electron microscope and included a Massachusetts (Mass) vaccine as control. One of the Ark-DPI vaccines (vaccine A) and the Mass vaccine had significantly (P < 0.005) fewer spikes than the other two Ark-DPI vaccines. We also found that the Ark-DPI and Mass vaccines had significantly (P < 0.005) fewer spike proteins per virus particle when compared to their respective challenge viruses. This observation is interesting and may provide some insight into the mechanism behind infectious bronchitis virus attenuation. No obvious differences were observed in virus morphology and no consistent trend in the number of spikes per virion was found in before- and after-spray samples. We also determined the vaccine titer before and after spray in embryonated eggs and found that both Ark-DPI and Mass vaccines had a similar drop in titer, 0.40 log₁₀ and 0.36 log₁₀, respectively. Based on these data, it appears that mechanical damage to the Ark-DPI vaccine is not occurring when delivered by a hatchery spray cabinet, suggesting that some other factor is contributing to the failure of that vaccine when given by that method.

La administración de la vacuna contra bronquitis infecciosa por aerosol con un gabinete en la planta de incubación no daña al coronavirus aviar determinado por microscopía electrónica y por titulación del virus.

Estudios previos han demostrado que la vacuna Arkansas tipo Industria Avícola de Delmarva (Ark-DPI) aplicada a pollos de 1 día de edad por aspersión mediante un gabinete mostró una replicación pobre y no protegió adecuadamente a los pollos contra el desafío con un virus homólogo, mientras que la misma vacuna administrada por gota ocular, mostró replicación y las aves estuvieron protegidas después de la exposición al virus homólogo. Para determinar si ocurre daño mecánico después de la aplicación por aerosol y si este daño juega un papel en la falla de la vacuna Ark-DPI, se analizó la morfología de tres vacunas Ark-DPI de tres diferentes fabricantes utilizando un microscopio electrónico y se incluyó una vacuna serotipo Massachusetts como control. Una de las vacunas Ark-DPI (vacuna A) y la vacuna contra el serotipo Massachusetts mostraron significativamente (P <0.005) menos espículas que las otras dos vacunas Ark-DPI. También se encontró que las vacunas Ark-DPI y Massachusetts tuvieron significativamente (P <0.005) menos espículas por partícula viral en comparación con sus respectivos virus de desafío. Esta observación es interesante y puede proporcionar alguna información sobre el mecanismo de la atenuación del virus de la bronquitis infecciosa. No se observaron diferencias evidentes en la morfología del virus y no se encontró ninguna tendencia constante en el número de espigas por virión en muestras antes y después del aerosol. También se determinó el título de la vacuna por inoculación en huevos embrionados de pollo antes y después del aerosol y se encontró que ambas vacunas Ark-DPI y la vacuna Massachusetts mostraron una disminución similar en el título, 0.40 log₁₀ y 0.36 log₁₀, respectivamente. Con base en estos datos, parece que no ocurre daño mecánico a la vacuna Ark-DPI cuando se aplica mediante un gabinete de aspersión en la planta de incubación, lo que sugiere que algún otro factor está contribuyendo

Two experiments were conducted to determine the persistence and tissue distribution of serotypes 1 and 2 of infectious bursal disease virus (IBDV) in specific-pathogen-free and vaccinated turkeys. In Experiment 1, three groups of 2-wk-old turkey poults, including a negative control group, were used. In groups 1 and 2, 13 poults in each group were challenged with either serotype 1 (STC) or serotype 2 (OH) strains using an inoculum of 10⁴ 50% embryo infectious dose (EID₅₀)/0.2 ml/bird. Thymus, bursa, spleen, kidney, lungs, liver, pancreas, caecum, and breast and thigh muscles were sampled at predetermined intervals. The bursal tissues from birds inoculated with either serotype were reverse transcriptase–PCR (RT-PCR) positive up to 21 days postinoculation (DPI). In both groups virus isolation from bursas was possible up to 14 DPI. Except for the bursas and spleens in birds inoculated with serotype 1 and bursas in birds inoculated with serotype 2, all other tissues were RT-PCR negative. In Experiment 2, five groups of turkey poults were used. At 4 wk of age, group 1 was challenged with a serotype 1 STC strain and group 2 with serotype 2 OH strain using an inoculum size of 10² EID₅₀/0.2 ml for both serotypes. Groups 3 and 4 were vaccinated at 2 wk of age using an inactivated serotype 1 IBDV vaccine. At 2 wk postvaccination, groups 3 and 4 were challenged with STC and OH strains respectively. From group 1, bursal, spleen, and liver tissues were RT-PCR positive up to 14 DPI; breast muscle and kidney tissues were positive up to 7 DPI; and lungs and pancreatic tissues were positive up to 3 DPI. From group 2, bursal tissues were RT-PCR positive up to 14 DPI and lung tissues up to 3 DPI. All of the tissue samples collected from groups 3, 4, and 5 were RT-PCR negative. Virus could not be isolated from RT-PCR positive bursal homogenate. In this work, it was confirmed that the virus persisted in the bursa longer than in any other tissues. The difference in the results between Experiments 1 and 2 could be due to the age of poults at vaccination and the higher inoculum size used in Experiment 1. This study indicates that turkeys are more resistant to IBDV as compared to chickens. Viruses of serotypes 1 and 2 infect turkeys and persist in bursal tissue for 14 days and RNA was detected up to 21 days.

Nota de investigación- Persistencia y distribución tisular en pavos de los serotipos 1 y 2 del virus de la enfermedad infecciosa de la bolsa.

Se realizaron dos experimentos para determinar la persistencia y la distribución en tejidos de los serotipos 1 y 2 del virus de la enfermedad infecciosa de la bolsa (IBDV) en pavos libres de patógenos específicos y en pavos vacunados. En el experimento 1, se utilizaron tres grupos de pavitos de dos semanas de edad, incluyendo un grupo control negativo. En los grupos uno y dos, trece pavipollos en cada grupo fueron desafiados ya sea con una cepa del serotipo 1 (STC) o con una cepa del serotipo 2 (OH) utilizando un inóculo de 10⁴ dosis infecciosas para embrión de pollo50% (EID₅₀)/0.2 ml/ave. Se recolectaron en intervalos predeterminados, muestras de timo, bolsa de Fabricio, bazo, riñones, pulmones, hígado, páncreas, ciego y de músculos de la pechuga y muslos. Los tejidos de la bolsa de Fabricio de aves inoculadas con cualquiera de los dos serotipos fueron positivos mediante transcripción reversa y PCR (RT-PCR) hasta 21 días después de la inoculación. En ambos grupos, el aislamiento viral a partir de bolsas fue posible hasta los catorce días después de la inoculación. Con excepción de las bolsas y bazos de aves inoculadas con el serotipo 1 y de bolsas en las aves inoculadas con el serotipo 2, todos los demás tejidos fueron negativos por RT-PCR. En el experimento 2, se utilizaron cinco grupos de pavos. A las 4 semanas de edad, el grupo 1 fue desafiado con una cepa del serotipo 1

Inoculation of specific-pathogen-free chickens and turkeys with five chicken parvoviruses (ChPV) and five turkey parvoviruses (TuPV) resulted in productive virus replication only in the homologous host species. A phylogenetic tree based on nucleotide sequences of the VP1 gene segment revealed a host-specific clustering of the virus strains. These results suggest that the VP1 gene plays an essential role in host specificity of ChPV and TuPV strains and could be a relevant target sequence for strain classification.

Nota de Investigación- Especificidad de hospedador y relaciones filogenéticas de parvovirus de pollos y pavos.

La inoculación de pollos y pavos libres de patógenos específicos con cinco parvovirus de pollo (ChPV) y cinco parvovirus de pavo (TuPV) dio lugar a la replicación viral productiva únicamente en la especie hospedadora homóloga. El árbol filogenético basado en las secuencias de nucleótidos del segmento del gene VP1 reveló una agrupación de las cepas virales específica de hospedador. Estos resultados sugieren que el gene VP1 juega un papel esencial en la especificidad del hospedador de las cepas de parvovirus de pollo y de pavo y podría ser una secuencia blanco relevante para la clasificación de las cepas.

Infectious coryza is an upper respiratory disease of chickens caused by Avibacterium paragallinarum. Outbreaks of infectious coryza caused by Av. paragallinarum serovar C-1 isolates in coryza-vaccinated flocks in Ecuador and Mexico have been reported. In the current study, the protection conferred by four commercially available, trivalent infectious coryza vaccines in chickens challenged with a serovar C-1 isolate from an apparent coryza vaccine failure in a layer flock in Mexico was evaluated. Only one infectious coryza vaccine provided a good protection level (83%) in vaccinated chickens. These results might explain the infectious coryza outbreaks in vaccinated flocks that have been observed in the field.

Nota de Investigación- Protección conferida por vacunas de coriza infecciosa contra la serovaridad emergente C-1 de Avibacterium paragallinarum.

La coriza infecciosa es una enfermedad del tracto respiratorio superior de los pollos causada por Avibacterium paragallinarum. Se han reportado brotes de coriza infecciosa causada por A. paragallinarum serovar C-1 aislados de parvadas vacunadas contra coriza en Ecuador y en México. En este estudio se evaluó la protección conferida por cuatro, vacunas trivalentes disponibles comercialmente contra la coriza infecciosa, en pollos desafiados con la serovariedad C-1 aislada de un brote aparentemente asociado con una falla vacunal en aves ponedoras en México. Sólo una vacuna contra la coriza infecciosa proporcionó un buen nivel de protección (83%) en los pollos vacunados. Estos resultados podrían explicar los brotes de coriza infecciosa en las aves vacunadas que han sido observados en el campo.

Electron-beam (eBeam) irradiation technology has a variety of applications in modern society. The underlying hypothesis was that eBeam-inactivated Salmonella enterica serovar Enteritidis (SE) cells can serve as a vaccine to control SE colonization and shedding in poultry birds. An eBeam dose of 2.5 kGy (kilograys) was used to inactivate a high-titer (10⁸ colony-forming units [CFU]) preparation of SE cells. Microscopic studies revealed that the irradiation did not damage the bacterial cell membranes. The vaccine efficacy was evaluated by administering the eBeam-killed SE cells intramuscularly (1 × 10⁶ CFU/bird) into 50-wk-old single comb white leghorn hens. On day 14 postvaccination, the hens were challenged orally with live SE cells (1 × 10⁹ CFU) and SE colonization of liver, spleen, ceca, and ovaries determined on day 23. Blood samples were collected on days 0, 14, and 23 postvaccination and the sera were analyzed to quantify SE-specific IgG titers. The vaccinated chickens exhibited significantly (P < 0.0001) higher SE-specific IgG antibody responses and reduced SE ceca colonization (1.46 ± 0.39 log₁₀ CFU/g) compared to nonvaccinated birds (5.32 ± 0.32 log₁₀ CFU/g). They also exhibited significantly lower SE colonization of the ovaries (1/30), spleen (3/30), liver (4/30), and ceca (7/30) compared to nonvaccinated birds. These results provide empirical evidence that eBeam-based SE vaccines are immunogenic and are capable of protecting chickens against SE colonization. The advantages of eBeam-based vaccine technology are that it is nonthermal, avoids the use of formalin, and can be used to generate inactivated vaccines rapidly to address strain-specific infections in farms or flocks.

Nota de investigación- Vacuna inactivada con un haz de electrones contra la colonización por Salmonella Enteritidis en gallinas en pelecha.

La tecnología de irradiación con haz de electrones (eBeam) tiene una variedad de aplicaciones en la sociedad moderna. La hipótesis subyacente fue que las células de Salmonella enterica serovar Enteritidis (SE) inactivadas por haz de electrones pueden servir como una vacuna para controlar la colonización y la diseminación de SE en las aves comerciales. Se utilizó una dosis de haz de electrones de 2.5 kGy (kilograys) para inactivar una preparación de células con un alto título (10⁸ unidades formadoras de colonias [CFU]). Los estudios microscópicos revelaron que la irradiación no daña a las membranas celulares bacterianas. La eficacia de la vacuna se evaluó mediante la administración por vía intramuscular de las células inactivadas por haz de electrones (1 × 10⁶ UFC/ave) en gallinas Leghorn de cresta sencilla de 50 semanas de edad. En el día 14 después de la vacunación, las gallinas fueron desafiadas oralmente con células vivas de SE (1 × 10⁹ CFU) y se determinó en el día 23, la colonización por SE en hígado, bazo, intestino ciego y ovarios. Se recolectaron muestras de sangre en los días 0, 14 y 23 después de la vacunación y los sueros se analizaron para cuantificar los títulos de IgG específicos para SE. Los pollos vacunados mostraron respuestas significativamente mayores (P <0.0001) de anticuerpos IgG específicos contra SE y una reducción en la colonización por SE en el ciego (1.46 ± 0.39 log₁₀ UFC/g) en comparación con las aves no vacunadas (5.32 ± 0.32 log10 UFC/g). También se observó una colonización significativamente menor por SE en los ovarios (1/30), bazo (3/30), hígado (4/30), y ciego (7/30) en comparación con las aves no vacunadas. Estos resultados proporcionan evidencia empírica de que las vacunas de SE con base en la tecnología de haz de electrones son inmunogénicas y son capaces de proteger a los pollos contra la colonización por SE. Las ventajas de la tecnología de vacunas con base de haz de

During the artificial insemination process, turkey breeder hens may become infected with influenza virus acquired from humans. The virus has been shown, through experimental infection, to localize in the reproductive tract, with limited dissemination in other tissues. A limited number of hens were used during these studies, and the overall flock morbidity, mortality, and fecundity were not able to be determined. The current case follows the progression of clinical signs in a flock of commercial breeder hens from onset of egg production losses in one house through the subsequent drops in four remaining houses. Each house contained approximately 3000 hens and followed a sequential loss of shell quality, reduced numbers of eggs, and fertility, while mild clinical signs were observed and mortality was slightly increased in a house with concurrent fowl cholera (Pasturella multocida) infection.

Reporte de caso- Pavas reproductoras maduras expuestas al virus de influenza pandémico H1N1: efectos resultantes en la morbilidad, mortalidad y fecundidad.

Durante el proceso de la inseminación artificial, las pavas reproductoras pueden infectarse con el virus de la influenza adquirido de los seres humanos. A través de la infección experimental se ha demostrado que el virus se localiza en el tracto reproductivo, con difusión limitada en otros tejidos. Se ha utilizó un número limitado de pavas durante estos estudios y la morbilidad, mortalidad y fecundidad totales en la parvada no se pudieron determinar. El presente caso sigue el desarrollo de los signos clínicos en una parvada de pavas reproductoras comerciales desde el inicio de las pérdidas en la producción de huevo en una caseta y a través de las disminuciones en la producción subsecuentes en las cuatro casetas restantes. Cada caseta contenía aproximadamente 3000 pavas y siguió a una reducción secuencial de la calidad del cascarón, del número de huevos y de la fertilidad, mientras que se observaron signos clínicos leves y la mortalidad se incrementó ligeramente en una caseta con por una infección concomitante de cólera aviar (Pasteurella multocida).

Outbreaks of highly pathogenic avian influenza (HPAI) virus, subtype H5N8, were observed in two different flocks of local broiler breeder farms and a commercial layer farm in South Korea. Clinically, the cases were characterized by a gradual increase in mortality, slow transmission, and unrecognizable clinical signs of HPAI. Gross observations in both cases included hemorrhagic or necrotic lesions in internal organs, such as serosal and mucosal membranes, spleen, and pancreas. Both cases exhibited similar histopathologic lesions, including multifocal malacia in the brain and multifocal or diffuse necrosis in the spleen and pancreas. Immunohistochemical results indicated that neurons and glial cells in the brain, myocytes in the heart, acinar cells in the pancreas, and mononuclear phagocytic cells in several visceral organs were immunopositive for avian influenza viral antigen. To experimentally reproduce the low pathogenicity and the mortality observed in these two cases, 18 specific-pathogen-free chickens and 18 commercial layers were divided into an H5N8 virus-inoculated group and a contact-exposed group. The mortality of the chickens in the inoculation group was 50%–100%, whereas the mean time to death was delayed or death did not occur in the contact-exposed group. The distributions of the viral antigens and histopathologic lesions in the experimental study were similar to those observed in the field cases. These findings suggest that the H5N8 virus induces a different pattern of pathobiology, including slow transmission and low mortality, compared with that of other HPAI viruses. This is the first pathologic description of natural cases of H5N8 in South Korea, and it may be helpful in understanding the pathobiology of novel H5N8 HPAI viruses.

Reporte de caso- Evaluación patológica de casos clínicos por el virus de la influenza aviar altamente patógeno subtipo H5N8, en reproductores pesados y gallinas de postura comerciales en Corea del Sur.

Brotes por el virus de influenza aviar altamente patógena (HPAI), subtipo H5N8, se observaron en dos lotes diferentes de granjas de reproductoras pesadas locales y en una granja de gallinas ponedoras comerciales en Corea del Sur. Clínicamente, los casos se caracterizaron por un aumento gradual de la mortalidad, transmisión lenta y signología no específica de influenza aviar de alta patogenicidad. Las observaciones macroscópicas en ambos casos incluyeron lesiones hemorrágicas o necróticas en los órganos internos, incluyendo membranas serosas y mucosas, el bazo y el páncreas. Ambos casos mostraron lesiones histopatológicas similares, incluyendo malacia multifocal en el cerebro y necrosis multifocal o difusa en el bazo y el páncreas. Los resultados de inmunohistoquímica indicaron reacciones inmunológicas positivas para el antígeno viral de la influenza aviar en las neuronas y células gliales en el cerebro, los miocitos en el corazón, las células acinares del páncreas y en las células mononucleares fagocíticas en varios órganos viscerales. Para reproducir de manera experimental la mortalidad observada en estos dos casos, 18 pollos libres de patógenos específicos y 18 ponedoras comerciales se asignaron en dos grupos, un grupo inoculado con el virus H5N8 y otro grupo de aves expuestas por contacto. La mortalidad de los pollos del grupo inoculado fue del 50% al 100%, mientras que el tiempo promedio de mortalidad se retrasó o no se observó mortalidad en el grupo de aves expuestas por contacto. Las distribuciones de los antígenos virales y las lesiones histopatológicas en el estudio experimental fueron similares a las observadas en los casos de campo. Estos hallazgos sugieren que el virus H5N8 induce un patrón de patobiología diferente, incluyendo una transmisión lenta y baja mortalidad, en comparación con otros virus altamente patógenos de influenza aviar. Esta es la primera descripción patológica de casos clínicos por el s