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15 June 2022 Comparison of Therapeutic Antibiotics, Probiotics, and Synthetic CpG-ODNs for Protective Efficacy Against Escherichia coli Lethal Infection and Impact on the Immune System in Neonatal Broiler Chickens
Thushari Gunawardana, Khawaja Ashfaque Ahmed, Shelly Popowich, Shanika Kurukulasuriya, Betty Lockerbie, Ruwani Karunarathana, Lisanework E. Ayalew, Mengying Liu, Suresh K. Tikoo, Susantha Gomis
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Abstract

The poultry industry needs alternatives to antibiotics, as there are growing public concerns about the emergence of antimicrobial resistance owing to antimicrobial use in animal production. We have reported that the administration of neonatal chicks with synthetic DNA oligodeoxynucleotides containing unmethylated cytosine guanine dinucleotide (CpG) motifs (CpG-ODN) can protect against bacterial pathogens in chickens. The objective of this study was to compare the immunoprotective effects of CpG-ODN and probiotics against Escherichia coli infection vs. commonly used therapeutic antibiotics. Day-old broiler chicks were divided into five groups (n = 35/group; 30 for the challenge experiment and 5 for the flow cytometry analysis). The chicks in Group 1 received a single dose of CpG-ODN by the intramuscular route on day 4 (D4) posthatch (PH), and Group 2 received drinking water (DW) with a probiotic product (D1–D15 PH, DW). The Group 3 chicks received tetracycline antibiotics during D9–D13 in DW; the Group 4 chicks got sodium sulfamethazine on D9, D10, and D15 PH in DW; and the Group 5 chicks were administered intramuscular (IM) saline D4 PH, DW. We challenged all the groups (n = 30/group) with E. coli (1 × 105 or 1 × 106 colony-forming units/bird) on D8 PH through the subcutaneous route. Our data demonstrated that the CpG-ODNs, but not the probiotics, could protect neonatal broiler chickens against lethal E. coli septicemia, as would the tetracycline or sodium sulfamethazine. The flow cytometry analysis (n = 5/group) revealed enrichment of immune cells in the CpG-ODN group and a marked decrease in macrophages and T-cell numbers in antibiotics-treated groups, indicating immunosuppressive effects. Our data showed that, like therapeutic antibiotics, CpG-ODNs reduced clinical signs, decreased bacterial loads, and induced protection in chicks against E. coli septicemia. Unlike therapeutic antibiotics-induced immunosuppressive effects, CpG-ODN caused immune enrichment by increasing chicken immune cells recruitment. Furthermore, this study highlights that, although therapeutic antibiotics can treat bacterial infections, the ensuing immunosuppressive effects may negatively impact the overall chicken health.

Comparación de antibióticos terapéuticos, probióticos y CpG-ODN sintéticos en su eficacia protectora contra la infección letal por Escherichia coli y el impacto en el sistema inmunológico en pollos de engorde recién eclosionados.

La industria avícola necesita alternativas a los antibióticos ya que existe una creciente preocupación pública sobre la aparición de resistencia a los antimicrobianos debido a su uso en la producción animal. Se ha informado que la administración de oligodesoxinucleótidos de ADN sintético que contienen motivos de dinucleótidos de citosina guanina (CpG) no metilados (CpG-ODN) a pollitos recién eclosionados puede proteger contra patógenos bacterianos en pollos. El objetivo de este estudio fue comparar los efectos inmunoprotectores de CpG-ODN y de los probióticos contra la infección por Escherichia coli frente a los antibióticos terapéuticos de uso común. Los pollos de engorde de un día se dividieron en cinco grupos (n = 35/grupo; 30 para el experimento de desafío y 5 para análisis de citometría de flujo). Los pollitos del Grupo 1 recibieron una dosis única de CpG-ODN por vía intramuscular el día 4 (D4) después de la eclosión (PH), y el Grupo 2 recibió agua potable (DW) con un producto probiótico del día uno al quince después de la eclosion en agua de bebida. Los pollitos del Grupo 3 recibieron tetraciclina durante los días nueve a trece (D9–D13) en agua de bebida (DW9; los pollitos del Grupo 4 recibieron sulfametazina de sodio en los días nueve, diez y 15 (D9, D10 y D15) después de la eclosion en agua de bebida; ya los pollitos del Grupo 5 se les administró solución salina intramuscular (IM) al día cuatro después de la eclosión en agua de bebida. Se desafiaron todos los grupos (n = 30/grupo) con E. coli (1 × 105 o 1 × 106 unidades formadoras de colonias/ave) en el día ocho después de la eclosión por vía subcutánea. Nuestros datos demostraron que los CpG-ODN, pero no los probióticos, pudieron proteger a los pollos de engorde recién eclosionados contra la septicemia letal por E. coli, al igual que la tetraciclina o la sulfametazina sódica. El análisis de citometría de flujo (n = 5/grupo) reveló un enriquecimiento de células inmunes en el grupo CpG-ODN y una marcada disminución en el número de macrófagos y células T en los grupos tratados con antibióticos, lo que indica efectos inmunosupresores. Nuestros datos mostraron que, al igual que los antibióticos terapéuticos, los CpG-ODN redujeron los signos clínicos, disminuyeron las cargas bacterianas e indujeron protección en los pollitos contra la septicemia por E. coli. A diferencia de los efectos inmunosupresores inducidos por antibióticos terapéuticos, los CpG-ODN provocaron un enriquecimiento inmunitario al aumentar el reclutamiento de células inmunitarias de pollo. Además, este estudio destaca que, aunque los antibióticos terapéuticos pueden tratar las infecciones bacterianas, los efectos inmunosupresores resultantes pueden tener un impacto negativo en la salud general de los pollos.

Thushari Gunawardana, Khawaja Ashfaque Ahmed, Shelly Popowich, Shanika Kurukulasuriya, Betty Lockerbie, Ruwani Karunarathana, Lisanework E. Ayalew, Mengying Liu, Suresh K. Tikoo, and Susantha Gomis "Comparison of Therapeutic Antibiotics, Probiotics, and Synthetic CpG-ODNs for Protective Efficacy Against Escherichia coli Lethal Infection and Impact on the Immune System in Neonatal Broiler Chickens," Avian Diseases 66(2), 165-175, (15 June 2022). https://doi.org/10.1637/aviandiseases-D-22-00011
Received: 3 January 2022; Accepted: 25 March 2022; Published: 15 June 2022
JOURNAL ARTICLE
11 PAGES


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KEYWORDS
alternatives to antibiotics
CpG-ODNs
Escherichia coli
probiotics
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