Dietary, environmental, and hereditary causes were reported as causative agents of angel wing syndrome in waterfowl. Since 2017, several Muscovy duck flocks at Behira governorate were found to exhibit this syndrome associated with the clinical symptoms of goose parvovirus (GPV) infection. Four strains of goose parvovirus named HS1–HS4 were isolated and identified from diseased ducks at some of these flocks. Phylogenetic analysis revealed clustering of these strains together and within a distinct monophyletic group in relation to GPV strains of Derzsy's disease and short beak and dwarfism syndrome (SBDS). Nucleotide identities with goose parvovirus strain B of Derzsy's disease were 95.7%–96.6%, and with the strain JS1603 of SBDS they were 96.8%–97.4%. However, nucleotide identities with Muscovy duck parvovirus strain FM were 74.1%–74.6%. The disease was reproduced experimentally via oral-route artificial infection with HS1 strain, and both clinical symptoms of goose parvovirus and angel wing syndrome were observed in the artificially infected Muscovy ducks, but with less severity in geese. This study demonstrated clear evidence for induction of angel wing syndrome, at least partially, with GPV infection in Muscovy duck. To the authors' knowledge, this is the first work to mention a viral cause of angel wing syndrome in waterfowl.

Participación del parvovirus del ganso en la inducción del síndrome de ala de ángel en patos reales.

Se han reportado causas dietéticas, ambientales y hereditarias como agentes causales del síndrome de alas de ángel en aves acuáticas. Desde el año 2017, se descubrió que varias parvadas de patos reales en la gobernación de Behira presentaban este síndrome asociado con los síntomas clínicos de la infección por parvovirus del ganso (con las siglas en inglés GPV). Se aislaron e identificaron cuatro cepas de parvovirus de ganso denominadas HS1–HS4 de patos enfermos en algunas de estas parvadas. El análisis filogenético reveló el agrupamiento de estas cepas juntas y dentro de un grupo monofilético distinto con relación con las cepas de parvovirus de ganso asociadas con la enfermedad de Derzsy y el síndrome de pico corto y enanismo (con las siglas en inglés SBDS). Las identidades de nucleótidos con la cepa B del parvovirus de la enfermedad de Derzsy fueron del 95.7 % al 96.6 %, y con la cepa JS1603 del síndrome de pico corto y enanismo fueron del 96.8 % al 97.4 %. Sin embargo, las identidades de nucleótidos con la cepa FM del parvovirus del pato Muscovy fueron del 74.1 % al 74.6 %. La enfermedad se reprodujo experimentalmente a través de una infección artificial por vía oral con la cepa HS1 y se observaron signos clínicos de parvovirus del ganso y del síndrome del ala de ángel en los patos reales infectados artificialmente, pero con menor gravedad en los gansos. Este estudio demostró una clara evidencia de la inducción del síndrome del ala de ángel, al menos parcialmente, con la infección por parvovirus del ganso en el pato real. Según el conocimiento de los autores, este es el primer trabajo que menciona una causa viral del síndrome del ala de ángel en aves acuáticas.

The success of treatments for, or prophylaxis of, coccidiosis with classical anticoccidial feed additives or alternative treatments can be measured with a variety of metrics. Three important metrics are body weight or body weight gain (BW or BWG), lesion scores (LS), and oocyst shedding (OS). A meta-analysis of floor-pen experiments was performed to determine if using LS and OS would lead to systematically different assessments compared to the use of BW at the end of the experiment, and to what degree changes in LS and OS are correlated with BW. We also investigated if there were days postinfection on which one could expect larger ratios between untreated control groups and treated groups for LS and OS as an aid to selecting sampling days. A total of 38 experiments from 37 articles in peer-reviewed journals were included. Data sets containing experiments that investigated LS or OS in addition to BW or BWG to assess anticoccidial feed additives or alternative treatment were tested for the effectiveness of the intervention either by univariate meta-analyses for each metric or by robust variance estimation multivariate meta-analysis combining BW with LS or BW with OS. The results did not show evidence that the inclusion of LS and OS in experimental designs to assess the effect of conventional and alternative feed additives with assumed anticoccidial activity systematically changed the conclusions drawn from an experiment, but there was no significant correlation between the LS and OS ratios of untreated and treated groups determined during the experiments with the ratios of the BW at the end of the experiment for each experiment. There was also no discernible relationship between LS or OS ratios and days postinfection.

Metanálisis del uso de puntajes de lesiones de Eimeria y recuentos de ooquistes en estudios con corrales en piso. El éxito de los tratamientos o la profilaxis de la coccidiosis con aditivos alimentarios anticoccidiales clásicos o tratamientos alternativos se puede medir con una variedad de mediciones. Tres mediciones importantes son el peso corporal o la ganancia de peso corporal (BW o BWG), las puntuaciones de lesiones (LS) y la eliminación de ooquistes (OS). Se realizó un metanálisis de experimentos con corrales en piso para determinar si el uso de las puntuaciones de lesiones y eliminación de ooquistes daría lugar a evaluaciones sistemáticamente diferentes en comparación con el uso del peso corporal al final del experimento, y en qué medida los cambios en puntuaciones de lesiones y eliminación de ooquistes se correlacionan con el peso corporal. También se investigó si había días posteriores a la infección en los que se podrían esperar mayores proporciones entre los grupos de control no tratados y los grupos tratados para las puntuaciones de lesiones y la eliminación de ooquistes como ayuda para seleccionar los días de muestreo. Se incluyeron un total de 38 experimentos de 37 artículos en revistas con comité editorial. Los conjuntos de datos que contenían experimentos que investigaron las puntuaciones de lesiones o la eliminación de ooquistes además del peso corporal o la ganancia de peso corporal para evaluar los aditivos alimentarios anticoccidiales o el tratamiento alternativo se probaron para determinar la efectividad de la intervención mediante metanálisis univariados para cada medición o mediante metanálisis multivariados de estimación de varianza robusta que combinaban el peso corporal con las puntuaciones de lesiones o el peso corporal con la eliminación de ooquistes. Los resultados no mostraron evidencia de que la inclusión de las puntuaciones de lesiones y eliminación de ooquistes en diseños experimentales para evaluar el efecto de los aditivos alimentarios convencionales y alternativos con supuesta actividad anticoccidial cambiara sistemáticamente las conclusiones extraídas de un experimento, pero no hubo una correlación significativa entre las proporciones de puntuaciones de lesiones y la eliminación de ooquistes de grupos no tratados y tratados determinadas durante los experimentos con las proporciones del peso corporal al final del experimento para cada experimento. Tampoco hubo una relación perceptible entre las proporciones de puntuaciones de lesiones o la eliminación de ooquistes y los días posteriores a la infección.

About 35% of all broiler flocks in the United States receive an anticoccidial vaccine, but it is not possible to easily differentiate Eimeria vaccine strains from Eimeria field isolates. Being able to do that would allow using vaccines in a more targeted way. The objective of this study was to collect Eimeria maxima isolates from broiler flocks that received anticoccidial feed additives and flocks that had been vaccinated against coccidia and then test them with a multilocus sequencing typing (MLST) scheme developed for this study. Fecal samples were obtained from commercial broiler flocks in Alabama and Tennessee. Oocyst counts in samples tended to be lower in flocks receiving anticoccidial feed additives and higher in vaccinated flocks. Selected samples were screened for presence of E. maxima by quantitative PCR, and Eimeria spp. composition was investigated by next-generation amplicon sequencing (NGAS) in 37 E. maxima positive samples. Other detected Eimeria spp. besides E. maxima were Eimeria acervulina in 35 samples, Eimeria praecox in 23 samples, Eimeria mitis or Eimeria mivati in 17 samples, and Eimeria necatrix or Eimeria tenella in 10 samples. Six partial E. maxima genes (dnaJ domain containing protein, 70-kDa heat shock protein, prolyl endopeptidase, regulator of chromosome condensation domain containing protein, serine carboxypeptidase, and vacuolar proton-translocating ATPase subunit) of 46 samples were sequenced. The MLST scheme was able to differentiate two vaccines from each other. Three of 17 samples from vaccinated flocks differed from the vaccine used in the flock, while 16 of 29 samples from unvaccinated flocks differed from the vaccine. However, there was also a large number of low-quality, ambiguous chromatograms and negative PCRs for the selected genes. If and when more advanced, possibly next-generation sequencing-based methods will be developed, the genes should be considered as targets.

Tipificación por secuenciación multilocus de Eimeria maxima en parvadas comerciales de pollos de engorde. Alrededor del 35% de todas las parvadas de pollos de engorde en los Estados Unidos recibe una vacuna anticoccidial, pero no es posible diferenciar fácilmente las cepas vacunales de Eimeria de los aislados de campo de Eimeria. La posibilidad de diferenciar entre cepas vacunales y de campo permitiría usar vacunas de una manera más específica. El objetivo de este estudio fue recolectar aislamientos de Eimeria maxima de parvadas de pollos de engorde que recibieron aditivos alimenticios anticoccidiales y parvadas que habían sido vacunadas contra coccidia y luego analizarlos con un esquema de tipificación por secuenciación multilocus (MLST) desarrollado para este estudio. Las muestras fecales se obtuvieron de parvadas comerciales de pollos de engorde en Alabama y Tennessee. Los conteos de ooquistes en las muestras tendieron a ser más bajos en las parvadas que recibieron aditivos alimenticios anticoccidiales y más altos en las parvadas vacunadas. Las muestras seleccionadas se examinaron para determinar la presencia de E. maxima mediante PCR cualitativa, y Eimeria spp. la composición se investigó mediante secuenciación de amplicones de próxima generación (NGAS) en 37 muestras positivas de E. maxima. Además de E. máxima, otras Eimeria spp detectadas, fueron Eimeria acervulina en 35 muestras, Eimeria praecox en 23 muestras, Eimeria mitis o Eimeria mivati en 17 muestras, y Eimeria necatrix o Eimeria tenella en 10 muestras. Se secuenciaron seis genes parciales de E. maxima (proteína que contiene al dominio dnaJ, proteína de choque térmico de 70 kDa, prolil endopeptidasa, proteína que contiene al regulador del dominio de condensación cromosómica, serina carboxipeptidasa y la subunidad de ATPasa vacuolar translocadora de protones) de 46 muestras. El esquema MLST pudo diferenciar dos vacunas entre sí. Tres de 17 muestras de parvadas vacunadas diferían de la vacuna utilizada en la parvada, mientras que 16 de 29 muestras de parvadas no vacunadas diferían de la vacuna. Sin embargo, también hubo una gran cantidad de cromatogramas ambiguos y de baja calidad y PCR negativos para los genes seleccionados. En Cuando se desarrollen métodos más avanzados, posiblemente de próxima generación, basados en la secuenciación, estos genes deben considerarse como objetivos.

The advent of turkey herpesvirus (HVT) vector vaccine technology (vHVT) has made a huge improvement in the prevention and control of several poultry diseases. The objective of this study was to compare, under experimental conditions, the protection conferred by different vaccination programs based on an HVT double-insert (infectious bursal disease {IBD] and Newcastle disease [ND]) vector vaccine (vHVT-IBD-ND) and an HVT single-insert (vHVT-ND) vector vaccine followed by a vaccination with a live ND vaccine at Day 1 only or at Days 1 and 14. Commercial broilers were vaccinated by the recombinant ND virus vaccines subcutaneously at 1 day old, in the hatchery, and challenged at 30 days of age using the Moroccan ND virus velogenic viscerotropic JEL strain. The results showed that the tested vaccine induced 95% to 100% clinical protection against mortality and clinical signs. The humoral immune response to vaccination was detected from 3 wk of age using enzyme-linked immunosorbent assay and hemagglutination inhibition tests. ND challenge virus shedding was significantly reduced in the vaccinated birds as compared to controls. Significant reduction of the cloacal shedding suggests that the vHVT-IBD-ND vaccine stimulates actively the immunity against the tested ND challenge virus. No significant differences were found between the vaccination programs based on vHVT-IBD-ND or on vHVT-ND.

Evaluación de la eficacia de las vacunas recombinantes contra el virus de la enfermedad de Newcastle (vHVT-IBD-ND de doble inserto y vHVT-ND de inserto único) seguidas de una vacunación con una vacuna viva para la enfermedad de Newcastle contra un desafío de la enfermedad de Newcastle velogénico marroquí en pollos de engorde comerciales.

El advenimiento de la tecnología de vacunas recombinantes (vHVT) del virus herpes del pavo (HVT) ha provocado una mejora en la prevención y el control de varias enfermedades avícolas. El objetivo de este estudio fue comparar, en condiciones experimentales, la protección conferida por diferentes programas vacunales basados en una vacuna recombinante HVT con doble inserto (bursitis infecciosa [EII] y enfermedad de Newcastle [ND]) (vHVT-IBD-ND) y una vacuna recombinante HVT con inserto única (vHVT-ND) seguida de una vacunación con una vacuna para Newcastle viva aplicada en el día 1 o en los días 1 y 14. Pollos de engorde comerciales se vacunaron con las vacunas recombinantes del virus de la enfermedad de Newcastle por vía subcutánea al día de edad, en la incubadora y se expusieron a los 30 días de edad utilizando la cepa JEL viscerotrópica velogénica del virus de la enfermedad de Newcastle de Marruecos. Los resultados mostraron que la vacuna evaluada indujo una protección clínica del 95% al 100% contra la mortalidad y los signos clínicos. La respuesta inmune humoral a la vacunación se detectó a partir de las 3 semanas de edad mediante ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas y pruebas de inhibición de la hemaglutinación. La excreción del virus de Newcastle de desafío se redujo significativamente en las aves vacunadas en comparación con los controles. La reducción significativa de la eliminación cloacal sugiere que la vacuna vHVT-IBD-ND estimula activamente la inmunidad contra el virus de Newcastle de desafío analizado. No se encontraron diferencias significativas entre los programas de vacunación basados en vHVT-IBD-ND o en vHVT-ND.

Hepatosplenitis or inclusion body disease is a fatal disease in owls caused by Columbid alphaherpesvirus 1 (CoHV-1). A few old case reports describe it worldwide. In Italy, knowledge regarding virus circulation and disease development is lacking. Four Eurasian eagle-owls (Bubo bubo), two adults and two juveniles, were submitted for postmortem examination showing aspecific clinical signs a few hours before death. Grossly disseminated petechial hemorrhages on serosal surfaces (n = 4), hepatic and splenic necrosis (n = 3), bilateral and symmetric necrosis of pharyngeal tonsils (n = 2), and diffuse and bilateral dark-red discoloration and firmness in lungs (n = 2) were seen. Tissues were sampled for histology, bacteriology, molecular testing, and transmission electron microscopy (TEM). On histology, disseminated petechial hemorrhages (n = 4) and necrosis of liver (n = 3) and spleen (n = 3) were seen, as well as lympho-histiocytic interstitial pneumonia and meningoencephalitis (n = 2). Intranuclear inclusion bodies (INIBs) were detected in one case. A panherpesviral PCR led to positive results in one case, identified in sequencing as CoHV-1. On TEM, intranuclear and intracytoplasmic virions with herpesviral morphology were seen in the same case. For the other three birds, the lack of PCR positivity, INIBs, and TEM detection could be linked to a possible reduction of the virus to undetectable levels. Death possibly occurred secondarily to bacterial infections, supposedly established during the acute phase of CoHV-1 infection. This paper reports the presence of CoHV-1in Italy and the development of a fatal form of the disease in a Eurasian eagle-owl.

Enfermedad con cuerpos de inclusión e infección por Alfaherpesvirus de las columbiformes 1 en un búho real euroasiático (Bubo bubo) del centro de Italia.

La hepatoesplenitis o enfermedad con cuerpos de inclusión es una enfermedad mortal en los búhos causada por el Alfaherpesvirus de las columbiformes 1 (CoHV-1). Algunos informes de casos antiguos lo describen en todo el mundo. En Italia, falta conocimiento sobre la circulación del virus y el desarrollo de enfermedades. Cuatro búhos reales euroasiáticos (Bubo bubo), dos adultos y dos juveniles, fueron sometidos a examen post mortem mostrando signos clínicos específicos unas horas antes de la muerte. Se observaron hemorragias petequiales muy diseminadas en las superficies serosas (n = 4), necrosis hepática y esplénica (n = 2), necrosis bilateral y simétrica de las tonsilas faríngeas (n = 2) y decoloración difusa y bilateral de color rojo oscuro y firmeza en los pulmones (n = 2). Se recolectaron muestras de tejidos para histología, bacteriología, pruebas moleculares y microscopía electrónica de transmisión (TEM). En la histología se observaron hemorragias petequiales diseminadas (n = 4) y necrosis de hígado (n = 3) y bazo (n = 3), así como neumonía intersticial linfohistiocítica y meningoencefalitis (n = 2). En un caso se detectaron cuerpos de inclusión intranucleares (INIB). Un método de PCR panherpesviral arrojó resultados positivos en un caso, identificado en la secuenciación como CoHV-1. Mediante microscopía electrónica de transmisión, se observaron viriones intranucleares e intracitoplasmáticos con morfología herpesviral en el mismo caso. Para las otras tres aves, la falta de positividad de PCR, la ausencia de cuerpos de inclusión intranucleares y de detección por microscopía electrónica de transmisión podría estar relacionada con una posible reducción del virus a niveles no detectables. La muerte posiblemente ocurrió de forma secundaria a infecciones bacterianas, posiblemente establecidas durante la fase aguda de la infección por el CoHV-1. Este artículo reporta la presencia de CoHV-1 en Italia y el desarrollo de una forma mortal de la enfermedad en un búho real euroasiático.

The ban of effective feed additives and therapeutics in the European Union and in other parts of the world led to a dramatic increase of histomonosis in turkeys. Despite the impact of the disease on the health and welfare of poultry, many questions remain open regarding the epidemiology of the pathogen. In this study, we retrospectively monitored a farm with recurring cases of histomonosis to identify possible routes of pathogen introduction and predisposing factors that may influence the disease development. We included 32 consecutive turkey flocks, which were fattened between 2007 and 2021 on the same farm under the same management and housing conditions. During this period, Histomonas meleagridis was detected in eight flocks of toms and four flocks of hens with a high variability in disease development. Outbreaks in toms led to significantly (P ≤ 0.05) higher mortality rates (5.3%–98.3%) than in hens (2.6%–6.1%). Most of the outbreaks (9/12) were diagnosed between June and September with a peak in August, suggesting a possible impact of higher temperatures either on the host or on the pathogen and pathogen-transmitting vectors. Further investigation is necessary to determine why hens might cope better with histomonosis than toms. Continuous flock and hygiene management is important to prevent an introduction of the causative pathogen and to control potential vectors.

Investigaciones retrospectivas de histomoniasis recurrente en una granja de pavos.

La prohibición de aditivos alimentarios y productos terapéuticos efectivos en la Unión Europea y en otras partes del mundo condujo a un aumento dramático de histomoniasis en pavos. A pesar del impacto de la enfermedad en la salud y el bienestar de las aves, quedan muchas interrogantes abiertas con respecto a la epidemiología del patógeno. En este estudio, se monitoreó retrospectivamente una granja con casos recurrentes de histomoniasis para identificar posibles rutas de introducción de patógenos y factores predisponentes que puedan influir en el desarrollo de la enfermedad. Se incluyeron 32 lotes de pavos consecutivos, que fueron engordados entre 2007 y 2021 en la misma granja bajo las mismas condiciones de manejo y alojamiento. Durante este período, se detectó Histomonas meleagridis en ocho parvadas de machos y cuatro parvadas de gallinas con una alta variabilidad en el desarrollo de la enfermedad. Los brotes en machos llevaron a tasas de mortalidad significativamente más altas (P ≤ 0.05) (5.3 %– - 98.3 %) que en gallinas (2.6 %– - 6.1 %). La mayoría de los brotes (9/12) se diagnosticaron entre junio y septiembre con un pico en agosto, lo que sugiere un posible impacto de las temperaturas más altas sobre el huésped o en el patógeno y los vectores transmisores del patógeno. Se necesita más investigación para determinar por qué las gallinas pueden sobrellevar mejor la histomoniasis que los machos. El manejo continuo de la parvada y la higiene es importante para prevenir la introducción del patógeno causante y controlar a los vectores potenciales.

Reoviral-induced tenosynovitis/viral arthritis is an economically significant disease of poultry. Affected birds present with lameness, unilateral or bilateral swollen hock joints or shanks, and/or reluctance to move. In severe cases, rupture of the gastrocnemius or digital flexor tendons may occur, and significant culling may be necessary. Historically, vaccination with a combination of modified live and inactivated vaccines has successfully controlled disease. Proper vaccination reduced vertical transmission and provided maternal-derived antibodies to progeny to protect against disease, at an age when they were most susceptible. Starting in 2011–2012, an increased incidence of tenosynovitis/viral arthritis was observed in chickens and turkeys. In chickens, progeny from reovirus-vaccinated breeders were affected, suggesting commercial vaccines did not provide adequate protection against disease. In turkeys, clinical disease was primarily in males, although females can also be affected. The most significant signs were observed around 14–16 wks of age and include reluctance to move, lameness, and limping on one or both legs. The incidence of tenosynovitis/viral arthritis presently remains high. Reoviruses isolated from clinical cases are genetically and antigenically characterized as variants, meaning they are different from vaccine strains. Characterization of the field isolates reveals multiple new genotypes and serotypes that are significantly different from commercial vaccines and each other. In 2012, a single prevalent virus was isolated from a majority of the cases submitted to the Poultry Diagnostic and Research Center at the University of Georgia. Genetic characterization of the σC protein revealed the early isolates belonged to genetic cluster (GC) 5. Soon after the initial identification of the GC5 variant reovirus, many broiler companies incorporated these isolates from their farms into their autogenous vaccines and continue to do so today. The incidence of GC5 field isolates has decreased significantly, likely because of the widespread use of the isolates in autogenous vaccines. Unfortunately, variant reoviruses belonging to multiple GCs have emerged, despite inclusion of these isolates in autogenous vaccines. In this review, an overview of nomenclature, sample collection, and diagnostic testing will be covered, and a summary of variant reoviruses isolated from clinical cases of tenosynovitis/viral arthritis over the past 10 yrs will be provided.

Estudio recapitulativo- Reovirus aviares de casos clínicos de tenosinovitis: una descripción general de los enfoques de diagnóstico y una revisión de 10 años de aislamientos y caracterización genética.

La tenosinovitis/artritis viral inducida por reovirus es una enfermedad económicamente significativa de la avicultura. Las aves afectadas presentan cojera, articulaciones de corvejones o patas inflamadas unilateral o bilateralmente y/o renuencia a moverse. En casos severos, puede ocurrir la ruptura de los tendones del gastrocnemio o del flexor digital, y puede ser necesario una eliminación de aves afectadas significativa. Históricamente, la vacunación con una combinación de vacunas vivas modificadas e inactivadas ha controlado con éxito la enfermedad. La vacunación adecuada redujo la transmisión vertical y proporcionó anticuerpos derivados de las reproductoras a la progenie para protegerlos contra la enfermedad, a una edad en la que eran más susceptibles. A partir de los años 2011-2012, se observó una mayor incidencia de tenosinovitis/artritis viral en pollos y pavos. En los pollos, la progenie de reproductores vacunados con reovirus se vio afectada, lo que sugiere que las vacunas comerciales no brindaron una protección adecuada contra la enfermedad. En pavos, la enfermedad clínica fue principalmente en machos, aunque las hembras también pueden verse afectadas. Los signos más significativos se observaron alrededor de las 14 a 16 semanas de edad e incluyen renuencia a moverse y cojera en una o ambas piernas. La incidencia de tenosinovitis/artritis viral actualmente sigue siendo alta. Los reovirus aislados de casos clínicos se caracterizan genética y antigénicamente como variantes, lo que significa que son diferentes de las cepas vacunales. La caracterización de los aislamientos de campo revela múltiples genotipos y serotipos nuevos que son significativamente diferentes de las vacunas comerciales y entre sí. En 2012, se aisló un solo virus prevalente de la mayoría de los casos presentados al Centro de Investigación y Diagnóstico Avícola de la Universidad de Georgia. La caracterización genética de la proteína sigma C reveló que los primeros aislamientos pertenecían al grupo genético 5 (GC5). Poco después de la identificación inicial de la variante GC5 del reovirus, muchas empresas de pollos de engorde incorporaron estos aislamientos de sus granjas en sus vacunas autógenas y continúan haciéndolo en la actualidad. La incidencia de aislamientos de campo de GC5 ha disminuido significativamente, probablemente debido al uso generalizado de los aislamientos en vacunas autógenas. Desafortunadamente, han surgido variantes de reovirus que pertenecen a múltiples grupos genéticos, a pesar de la inclusión de estos aislados en vacunas autógenas. En esta revisión, se cubrirá una descripción general de la nomenclatura, la recolección de muestras y las pruebas de diagnóstico, y se brindará un resumen de las variantes de reovirus aisladas de casos clínicos de tenosinovitis/artritis viral durante los últimos 10 años.

Prevention of tenosynovitis/viral arthritis caused by variant avian reoviruses within commercial broiler production has become increasingly more challenging because of the lack of protection afforded by the current commercially available vaccines. Avian reoviruses isolated from clinical cases of tenosynovitis/viral arthritis in recent years are antigenically distinct from nearly all of the commercially licensed modified live and inactivated biologics available in the United States. The emergence of new variants is likely shaped by a lack of homologous protection coupled with selection pressure influences and results in antigenically diverse populations of avian reoviruses. One tool available to the poultry industry is the use of autogenous (custom) vaccines. Although these can be effective, isolation, characterization, and screening of isolates from clinical cases is paramount for the selection of isolates to include in these vaccines. With no treatment options, control can only be attained via prevention of infection. To achieve this goal, commercially licensed products with antigenic applicability and broadly cross-protective vaccine strains are needed.

Estudio recapitulativo- Control de campo de los reovirus aviares en la producción comercial de pollos de engorde.

La prevención de la tenosinovitis/artritis viral causada por variantes de reovirus aviares dentro de la producción comercial de pollos de engorde se ha vuelto cada vez más difícil debido a la falta de protección que brindan las vacunas disponibles comercialmente en la actualidad. Los reovirus aviares aislados de casos clínicos de tenosinovitis/artritis viral en los últimos años son antigénicamente distintos de casi todos los biológicos vivos modificados e inactivados con licencia y disponibles comercialmente en los Estados Unidos. La aparición de nuevas variantes probablemente se deba a la falta de protección homóloga junto con las influencias de la presión de selección y da como resultado poblaciones antigénicamente diversas de reovirus aviares. Una herramienta disponible para la industria avícola es el uso de vacunas autógenas (elaboradas de acuerdo a los virus de cada compañía). Si bien estos pueden ser efectivos, el aislamiento, la caracterización y la detección de aislamientos de casos clínicos son de suma importancia para la selección de aislamientos para incluir en estas vacunas. Sin opciones de tratamiento, el control solo se puede lograr a través de la prevención de la infección. Para lograr este objetivo, se necesitan productos comercialmente autorizados con aplicabilidad antigénica y cepas de vacunas que induzcan protección cruzada amplia.

Avian reoviruses have sole or partial responsibility for a wide range of conditions that are of economic concern to the poultry industries in the United States. It is difficult, however, to determine the exact cost of reoviral-induced disease to this industry for several reasons. Avian reoviruses are ubiquitous in commercial poultry operations, but vary greatly in their ability to cause disease. Many reovirus isolates are not pathogenic, and this contributes to the difficulty in determining their role in production losses or whether they are merely coincidental findings of little or no importance. Results of infection with this virus can be difficult to measure in a commercial setting, aside from morbidity, mortality, or loss of finished product in a processing plant due to condemnation or trim. The fact that there is a relatively high morbidity rate, and at the same time a low mortality rate, makes it extremely difficult to accurately estimate the economic impact of infection with this virus. Variations in the pathogenicity of the virus, the extent of infection within a flock, the blending of progeny from different breeder source flocks into a broiler house, and the lack of separation of infected birds from uninfected birds at processing makes evaluation of economic variables, such as feed conversion and weight gain, very difficult to ascertain. The broiler and turkey industries have been surveyed on the importance of this virus in their respective operations and the results will be consolidated here to consider the economic impact to the poultry industries in the United States.

Incidencia e impacto económico de los reovirus en las industrias avícolas de los Estados Unidos.

Los reovirus aviares tienen la responsabilidad exclusiva o parcial de una amplia gama de condiciones que son de interés económico para las industrias avícolas en los Estados Unidos. Sin embargo, es difícil determinar el costo exacto de la enfermedad inducida por reovirus para esta industria por varias razones. Los reovirus aviares son ubicuos en las operaciones avícolas comerciales, pero varían mucho en su capacidad para causar enfermedades. Muchos aislados de reovirus no son patógenos, y esto contribuye a la dificultad de determinar su papel en las pérdidas de producción o si son solo hallazgos incidentales de poca o ninguna importancia. Los resultados de la infección con este virus pueden ser difíciles de medir en un entorno comercial, además de la morbilidad, la mortalidad o la pérdida del producto terminado en una planta de procesamiento debido a los decomisos totales o parciales. El hecho de que exista una tasa de morbilidad relativamente alta, y al mismo tiempo una tasa de mortalidad baja (1), hace que sea extremadamente difícil estimar con precisión el impacto económico de la infección por este virus. Las variaciones en la patogenicidad del virus, el alcance de la infección dentro de una parvada, la mezcla de progenie de diferentes parvadas de origen reproductor en un galpón de pollos de engorde y la falta de separación de las aves infectadas de las no infectadas en el procesamiento hace que la evaluación de las variables económicas, como como la conversión alimenticia y la ganancia de peso, sean muy difíciles de determinar. Las industrias de pollos de engorde y pavos han sido encuestadas sobre la importancia de este virus en sus respectivas operaciones y los resultados se consolidarán en este estudio para considerar el impacto económico en las industrias avícolas en los Estados Unidos.

Avian reoviruses are ubiquitous in poultry production worldwide and can be transmitted vertically or horizontally among chickens. The pathogenicity of reoviruses can range from very pathogenic viruses that affect multiple tissues and organs to apathogenic. Avian reoviruses have been associated with many disease presentations, and two of the most economically significant diseases are viral arthritis/tenosynovitis and viral enteritis. Viral arthritis/tenosynovitis has been recognized since the 1950s and essentially disappeared after development of attenuated live and inactivated vaccines in the 1980s but re-emerged in 2011 due to the emergence of antigenic variants. Viral enteritis was first recognized in the 1970s and became the predominant reovirus-associated disease between 2006 and 2011 due to the emergence of pathogenic enterotropic reoviruses. Pathogenicity of reovirus isolates can be evaluated in several ways, including inoculation of day-old broiler chicks with low maternal reovirus antibody titers via the foot pad route or the oral and intratracheal route. Pathogenic reoviruses induce foot pad inflammation within 3 days of inoculation, and more pathogenic reoviruses are able to disseminate to and damage visceral organs. Only reovirus infections in young chickens result in disease due to age-related resistance to disease development.

Reoviruses exist as many serotypes and subtypes with various degrees of interrelatedness. The earliest reovirus strains in the United States were antigenically related to each other and are referred to as S1133-like viruses, but in the 2000s, reoviruses emerged that were antigenically different from the S1133-like viruses. Virus neutralization assay using polyclonal antisera has been used to classify the emerging variant reoviruses into serogroups. The first reovirus vaccines were developed in the 1970s, and by the 1980s breeder vaccination programs were established that protected breeders, prevented vertical transmission of reovirus, and provided maternal immunity to the progeny during the crucial first 3 wk of life. With the emergence of antigenic variant reoviruses in the 2000s, vaccination programs using S1133-like vaccines became ineffective. The poultry industry has relied on vaccination with autogenous inactivated reovirus vaccines to alleviate losses due to viral arthritis/tenosynovitis and viral enteritis. Virus isolates used for autogenous vaccines must be updated regularly and are selected based on pathotype, serotype, or Sigma C (σC) genotype. Live attenuated S1133 vaccines are still used in breeder chickens for the priming effect, followed by one or more injections of the inactivated licensed and/or autogenous vaccines. The route of vaccination and the number of doses received by breeder chickens are very important for a sufficient antibody response. Intramuscular vaccination with inactivated vaccines elicits the highest antibody response, while subcutaneous vaccination with inactivated vaccines elicits a low antibody response. More recently, research has focused on development of alternative vaccines and vaccination strategies. An inactivated variant reovirus vaccine was developed that elicits protection against multiple variant serotypes, and experimental recombinant and subunit vaccines have been described and show potential. More research needs to be done to develop better vaccines, vaccination programs, and other control measures for preventing reovirus infection, transmission, and losses due to disease.

Estudio recapitulativo- Evaluación de patogenicidad y antigenicidad de reovirus aviares y control de enfermedades mediante vacunación

Los reovirus aviares son ubicuos en la producción avícola en todo el mundo y pueden transmitirse por vías vertical u horizontal entre los pollos. La patogenicidad de los reovirus puede variar desde virus muy patógenos que afectan múltiples tejidos y órganos hasta virus apatógenos. Los reovirus aviares se han asociado con muchas presentaciones de enfermedades, y dos de las enfermedades más significativas desde el punto de vista económico son la artritis/tenosinovitis viral y la enteritis viral. La artritis/tenosinovitis viral se ha reconocido desde la década de 1950 y esencialmente desapareció después del desarrollo de vacunas vivas atenuadas e inactivadas en la década de 1980, pero resurgió en 2011 debido a la aparición de variantes antigénicas. La enteritis viral se reconoció por primera vez en la década de 1970 y se convirtió en la enfermedad predominante asociada a reovirus entre 2006 y 2011 debido a la aparición de reovirus enterotrópicos patógenos. La patogenicidad de los aislados de reovirus se puede evaluar de varias maneras, incluida la inoculación de pollos de engorde de un día con títulos bajos de anticuerpos maternos contra el reovirus a través de la vía del cojinete almohadilla plantar o la vía oral e intratraqueal. Los reovirus patógenos inducen la inflamación de las almohadillas de las patas dentro de los tres días posteriores a la inoculación, y más reovirus patógenos pueden diseminarse y dañar los órganos viscerales. Solo las infecciones por reovirus en pollos jóvenes resultan en enfermedades debido a la resistencia relacionada con la edad al desarrollo de la enfermedad. Los reovirus existen como muchos serotipos y subtipos con varios grados de interrelación. Las primeras cepas de reovirus en los Estados Unidos estaban relacionadas antigénicamente entre sí y se conocen como virus relacionados a la cepa S1133, pero en la década de 2000 surgieron reovirus que eran antigénicamente diferentes de los virus relacionados con S1133. Se ha utilizado el ensayo de neutralización de virus con antisueros policlonales para clasificar las variantes de reovirus emergentes en serogrupos. Las primeras vacunas contra el reovirus se desarrollaron en la década de 1970, y en la década de 1980 se establecieron programas de vacunación para reproductores que protegían a los reproductores, prevenían la transmisión vertical de reovirus y proporcionaban inmunidad materna a la progenie durante las cruciales primeras tres semanas de vida. Con la aparición de variantes antigénicas de reovirus en la década de 2000, los programas de vacunación con vacunas relacionadas con la cepa S1133 se volvieron ineficaces. La industria avícola se ha basado en la vacunación con vacunas autógenas de reovirus inactivado para aliviar las pérdidas debidas a artritis/tenosinovitis viral y enteritis viral. Los aislados de virus utilizados para las vacunas autógenas deben actualizarse con regularidad y se seleccionan según el patotipo, el serotipo o el genotipo Sigma C (σC). Las vacunas vivas atenuadas S1133 todavía se usan en pollos reproductores para el efecto de preparación, seguidas de una o más inyecciones de las vacunas inactivadas autorizadas y/o autógenas. La vía de vacunación y el número de dosis recibidas por los pollos reproductores son muy importantes para una respuesta de anticuerpos suficiente. La vacunación intramuscular con vacunas inactivadas provoca la mayor respuesta de anticuerpos, mientras que la vacunación subcutánea con vacunas inactivadas provoca una baja respuesta de anticuerpos. Más recientemente, la investigación se ha centrado en el desarrollo de vacunas alternativas y estrategias de vacunación. Se desarrolló una vacuna de reovirus variante inactivada que provoca protección contra múltiples serotipos variantes, y se han descrito vacunas experimentales recombinantes y de subunidades que muestran potencial. Se necesita más investigación para desarrollar mejores vacunas, programas de vacunación y otras medidas de control para prevenir la infección, transmisión y pérdidas por reovirus debido a la enfermedad.

Avian reovirus variants (ARVs) are important pathogens currently causing losses in poultry production. These variants escape protection elicited by conventional vaccines, i.e., S1133, 2408, and 1733 in chickens. Historically, ARVs have been classified according to their antigenic type and relative pathogenicity. Due to the virus variability, antigenic testing is difficult and laboratory specific, while pathotyping is costly and complex. Current molecular classification methods focus only on one gene, and genomic changes within this gene are not predictive of changes in antigenicity and pathogenicity. This review focuses on existing literature on reovirus antigenicity, pathogenicity, and molecular assessments as an aid to provide insights on how to predict antigenic and pathogenic phenotypes based on genomic information and future focus on development of new and comprehensive classification systems.

Estudio recapitulativo- Caracterización molecular de reovirus aviares variantes y su relación con antigenicidad y patogenicidad.

Las variantes del reovirus aviar (ARV) son patógenos importantes que actualmente causan pérdidas en la producción avícola. Estas variantes escapan a la protección provocada por las vacunas convencionales, que incluyen a las cepas S1133, 2408 y 1733 en pollos. Históricamente, los reovirus aviares se han clasificado según su tipo antigénico y patogenicidad relativa. Debido a la variabilidad del virus, las pruebas antigénicas son difíciles y específicas de laboratorio, mientras que la patotipificación es costosa y compleja. Los métodos de clasificación molecular actuales se enfocan solo en un gene, y los cambios genómicos dentro de este gene no predicen cambios en la antigenicidad y patogenicidad. Esta revisión se centra en la literatura existente sobre la antigenicidad, la patogenicidad y las evaluaciones moleculares de los reovirus como una ayuda para proporcionar información sobre cómo predecir los fenotipos antigénicos y patógenos en función de la información genómica y el enfoque futuro en el desarrollo de sistemas de clasificación nuevos y completos.

Avian reovirus (ARV) has been determined to be the etiologic agent of viral arthritis/tenosynovitis. In Israel, meat-type chickens, including broilers and breeders, are the most affected. Severe disease symptoms can appear in broiler flocks at a very young age because of early exposure and vertical transmission, causing significant welfare problems. Jewish laws define birds with inflamed, damaged, or torn gastrocnemius and digital flexor tendons as religious condemnations (non-kosher), resulting in severe economic losses for the poultry industry. Vaccination of breeders is a strategy to control the disease by reducing vertical transmission and providing maternal-derived antibodies to the progeny. This review describes Israel's ARV variants and the various vaccines developed over the years. Identification of co-circulating variants triggered the development of multivalent autogenous inactivated vaccines. However, the genotype-matched vaccines failed to provide protection, resulting in an increased prevalence of Cluster II ARV (classified as genotyping cluster 5 in the ARV common world classification). Since 2014, ARV Cluster II has been dominant in Israel. In 2015, the dominant variant s7585 tropism changed the virus pathogenesis and affected broilers with severe clinical signs between 12 and 15 days of age. A new vaccine approach developed in Israel used controlled exposure of the breeding flock to virulent ARV at the age when they are resistant to infection. This approach significantly reduced clinical field cases and reovirus isolations of breeding and broiler flocks between 2020 and 2022.

Estudio recapitulativo- Reovirus aviares en Israel, variantes y vacunas: Una revisión.

Se ha determinado que el reovirus aviar (ARV) es el agente etiológico de la artritis/tenosinovitis viral. En Israel, los pollos de carne, incluidos los pollos de engorde y reproductores, son los más afectados. Los signos severos de la enfermedad pueden aparecer en parvadas de pollos de engorde a una edad muy temprana debido a la exposición temprana y la transmisión vertical, lo que causa problemas significativos de bienestar. Las leyes judías definen a las aves con gastrocnemio inflamado, dañado o desgarrado y tendones flexores digitales como decomiso religiosas (no kosher), lo que resulta en graves pérdidas económicas para la industria avícola. La vacunación de reproductoras es una estrategia para controlar la enfermedad al reducir la transmisión vertical y proporcionar anticuerpos derivados de las reproductoras a la progenie. Esta revisión describe las variantes de reovirus aviares de Israel y las diversas vacunas desarrolladas a lo largo de los años. La identificación de variantes co-circulantes desencadenó el desarrollo de vacunas inactivadas autógenas multivalentes. Sin embargo, las vacunas elaboradas con genotipos compatibles no brindaron protección, lo que resultó en una mayor prevalencia de reovirus aviares del grupo II. Desde 2014, el grupo II de los reovirus aviares ha sido dominante en Israel. En 2015, el tropismo de la variante dominante s7585 cambió la patogenia del virus y afectó a los pollos de engorde con signos clínicos severos entre los 12 y los 15 días de edad. Un nuevo enfoque de vacuna desarrollado en Israel utilizó la exposición controlada de la parvada reproductora a reovirus aviares virulentos a la edad en que son resistentes a la infección. Este enfoque redujo significativamente los casos clínicos de campo y los aislamientos de reovirus de parvadas de reproductores y pollos de engorde entre 2020 y 2022.

Viral arthritis/tenosynovitis, a disease caused by avian reovirus (ARV), leads to great economic losses for the chicken industry worldwide. Since autumn 2011, the poultry industries in the United States and Canada have sustained significant economic losses in the progeny of broiler breeders vaccinated with classic strains of ARV. Vaccination failure has been caused by field challenge with variant ARVs. The variant field ARVs are refractory to the immunity stimulated by classic vaccines and have become the prevalent challenge in the field. Because all genotypes described in the literature have been reported to be circulating in Canada, genotyping of circulating ARVs is paramount for the selection of appropriate isolates, representative of the field challenge, for use in autogenous vaccines. In this review, the history of ARVs and the current situation in Canada are discussed. On the basis of recent field data, inadequate measures commonly used in the field are discussed, and successful vaccination strategies are recommended.

Estudio recapitulativo- Revisión de la artritis viral en Canadá

La artritis/tenosinovitis viral, una enfermedad causada por el reovirus aviares (ARV), genera grandes pérdidas económicas para la industria avícola en todo el mundo. Desde el otoño del 2011, las industrias avícolas de los Estados Unidos y Canadá han sufrido pérdidas económicas significativas en la progenie de reproductoras de pollos de engorde vacunadas con cepas clásicas de reovirus aviares. Las fallas de la vacunación han sido causadas por el desafío de campo con reovirus aviares variantes. Los reovirus aviares de campo variantes son refractarios a la inmunidad estimulada por las vacunas clásicas y se han convertido en el desafío predominante en el campo. Debido a que se ha reportado que todos los genotipos descritos en la literatura están circulando en Canadá, la determinación del genotipo de los reovirus aviares circulantes es fundamental para la selección de aislamientos apropiados, representativos del desafío de campo, para su uso en vacunas autógenas. En esta revisión, se discute la historia de los reovirus aviares y la situación actual en Canadá. Sobre la base de datos de campo recientes, se analizan las medidas inadecuadas comúnmente utilizadas en el campo y se recomiendan estrategias de vacunación exitosas.

Avian reovirus (ARV) is highly disseminated in commercial Brazilian poultry farms, causing arthritis/tenosynovitis, runting-stunting syndrome, and malabsorption syndrome in different meat- and egg-type birds (breeders, broilers, grillers, and layers). In Brazil, ARV infection was first described in broilers in the 1970s but was not considered an important poultry health problem for decades. A more concerning outcome of field infections has been observed in recent years, including condemnations at slaughterhouses because of the unsightly appearance of chicken body parts, mainly the legs. Analyses of the performance of poultry flocks have further evidenced economic losses to farms. Genetic and antigenic characterization of ARV field strains from Brazil demonstrated a high diversity of lineages circulating in the entire country, including four of the five main phylogenetic groups previously described (I, II, III, and V). It is still unclear if all of them are associated with different diseases affecting flocks' performance in Brazilian poultry. ARV infections have been controlled in Brazilian poultry farms by immunization of breeders and young chicks with classical commercial live vaccine strains (S1133, 1733, 2408, and 2177) used elsewhere in the Western Hemisphere. However, genetic and antigenic variations of the field isolates have prevented adequate protection against associated diseases, so killed autogenous vaccines are being produced from isolates obtained on specific farms. In conclusion, ARV field variants are continuously challenging poultry farming in Brazil. Epidemiological surveillance combined with molecular biological analyses from the field samples, as well as the development of vaccine strains directed toward the ARV circulating variants, are necessary to control this economically important poultry pathogen.

Reovirus aviares en granjas avícolas de Brasil.

El reovirus aviar (ARV) está muy diseminado en las granjas avícolas comerciales brasileñas y causa artritis/tenosinovitis viral, síndrome de retraso de enanismo infeccioso y síndrome de malabsorción en diferentes tipos de aves de carne y huevos (reproductoras, pollos de engorde, parrillas y ponedoras). En Brasil, la infección por reovirus aviares se describió por primera vez en pollos de engorde en la década de 1970, pero no se consideró un problema importante de salud avícola durante décadas. En los últimos años se ha observado un resultado más preocupante de las infecciones de campo, incluidos los decomisos en las plantas de procesamiento debido a la apariencia antiestética de las partes del cuerpo de los pollos, principalmente las patas. Los análisis del desempeño de las parvadas avícolas han evidenciado pérdidas económicas adicionales para las granjas. La caracterización genética y antigénica de las cepas de campo de reovirus aviares de Brasil demostró una gran diversidad de linajes que circulan en todo el país, incluidos cuatro de los cinco grupos filogenéticos principales descritos anteriormente (I, II, III y V). Todavía no está claro si todos ellos están asociados con diferentes enfermedades que afectan el rendimiento de las parvadas en las aves de corral brasileñas. Las infecciones por reovirus aviares se han controlado en granjas avícolas brasileñas mediante la inmunización de reproductores y pollitos jóvenes con cepas vacunales vivas comerciales clásicas (S1133, 1733, 2408 y 2177) utilizadas en otras partes del hemisferio occidental. Sin embargo, las variaciones genéticas y antigénicas de los aislamientos de campo han impedido una protección adecuada contra enfermedades asociadas, por lo que se están produciendo vacunas autógenas inactivadas a partir de aislamientos obtenidos en granjas específicas. En conclusión, las variantes de campo de ARV son un desafío continuo para la avicultura en Brasil. La vigilancia epidemiológica combinada con análisis de biología molecular de las muestras de campo, así como el desarrollo de cepas de vacunas dirigidas a las variantes circulantes de los reovirus aviares, son necesarias para controlar este patógeno avícola económicamente importante.

Avian orthoreoviruses are causative agents of tenosynovitis and viral arthritis in both chickens and turkeys. Current commercial reovirus vaccines do not protect against disease caused by emerging variants. Custom-made inactivated reovirus vaccines are commonly utilized to help protect commercial poultry against disease. Antibody epitopes located on the viral attachment protein, σC, involved in virus neutralization, have not been clearly identified. In this study, the S1133 vaccine strain (Genetic Cluster 1 [GC1], a GC1 field isolate (117816), and a GC5 field isolate (94826) were determined to be genetically and serologically unrelated. In addition, chickens were vaccinated with either a commercial S1133 vaccine, 117816 GC1, or 94826 GC5, and sera were used in peptide microarrays to identify linear B-cell epitopes within the σC protein. Specific-pathogen-free (SPF) chickens were vaccinated twice with either: 1) live and live, 2) inactivated and inactivated, or 3) a combination of live and inactivated vaccines. Epitope mapping was performed on individual serum samples from birds in each group using S1133, 117816, and 94826 σC sequences translated into an overlapping peptides and spotted onto microarray chips. Vaccination with a combination of live and inactivated viruses resulted in a greater number of B-cell binding sites on the outer-capsid domains of σC for 117816 and 94826, but not for S1133. In contrast, the S1133-vaccinated birds demonstrated fewer epitopes, and those epitopes were located in the stalk region of the protein. However, within each of the vaccinated groups, the highest virus-neutralization titers were observed in the live/inactivated groups. This study demonstrates differences in antibody binding sites within σC between genetically and antigenically distinct reoviruses and provides initial antigenic characterization of avian orthoreoviruses and insight into the inability of vaccine-induced antibodies to provide adequate protection against variant reovirus-induced disease.

Análisis de la respuesta inmune e identificación de epítopos de anticuerpos contra la proteína Sigma C de Orthoreovirus aviar después de la inmunización con vacunas vivas o inactivadas.

Los ortoreovirus aviares son agentes causantes de tenosinovitis y artritis viral tanto en pollos como en pavos. Las vacunas de reovirus comerciales actuales no protegen contra la enfermedad causada por variantes emergentes. Las vacunas de reovirus inactivadas hechas a medida se utilizan comúnmente para ayudar a proteger a las aves comerciales contra enfermedades. Los epítopos de anticuerpos ubicados en la proteína de unión viral, σC, involucrada en la neutralización del virus, no se han identificado claramente. En este estudio, se determinó que la cepa vacunal S1133 (Grupo genético 1 (GC1), un aislado de campo del grupo genético 1 (117816) y un aislado de campo del grupo genético 5 (GC5) (94826) no tenían ninguna relación genética ni serológica. Además, los pollos se vacunaron con una vacuna comercial S1133, 117816 GC1 o 94826 GC5, y se usaron sueros en micromatrices de péptidos para identificar epítopos de células B lineales dentro de la proteína σC. Pollos libres de patógenos específicos (SPF) fueron vacunados dos veces con: 1) vivo y vivo, 2) inactivado e inactivado, o 3) una combinación de vacunas vivas e inactivadas. El mapeo de epítopos se realizó en muestras de suero individuales de aves en cada grupo usando secuencias S1133, 117816 y 94826 σC colocadas en microchips. La vacunación con una combinación de virus vivos e inactivados dio como resultado un mayor número de sitios de unión de células B en los dominios de la cápside externa de σC para 117816 y 94826, pero no para S1133. Por el contrario, las aves vacunadas con S1133 demostraron menos epítopos y esos epítopos estaban ubicados en la región del tallo de la proteína. Sin embargo, dentro de cada uno de los grupos vacunados, los títulos de neutralización de virus más altos se observaron en los grupos vivos/inactivados. Este estudio demuestra diferencias en los sitios de unión de anticuerpos dentro de σC entre reovirus genética y antigénicamente distintos y proporciona una caracterización antigénica inicial de los ortoreovirus aviares y una idea de la incapacidad de los anticuerpos inducidos por la vacuna para proporcionar una protección adecuada contra la enfermedad inducida por reovirus variante.

The Reoviridae family represents the largest family of double-stranded RNA viruses, and members have been isolated from a wide range of mammals, birds, reptiles, fishes, insects, and plants. Orthoreoviruses, one of the 15 recognized genera in the Reoviridae family, can infect humans and nearly all mammals and birds. Genomic characterization of reoviruses has not been adopted on a large scale because of the complexity of obtaining sequences for all 10 segments. In this study, we develop a time-efficient and practical method to enrich reovirus sequencing reads from isolates that allows for full-genome recovery using a single-primer amplification method coupled with next-generation sequencing. We refer to this protocol as reovirus–single-primer amplification (R-SPA). Our results demonstrate that most of the genes are covered with at least 500 reads per base space. Furthermore, R-SPA covers both the 5′ and 3′ ends of each reovirus genes. In summary, this study presents a universal and fast amplification protocol that yields sufficient double-stranded cDNA and facilitates and expedites the whole-genome sequencing of reoviruses.

Protocolo universal de amplificación con un iniciador único para realizar la secuenciación del genoma completo de orthoreovirus aviares con ARN de doble cadena y segmentados

La familia Reoviridae representa la familia más grande de virus de ARN de doble cadena y se han aislado miembros de una amplia variedad de mamíferos, aves, reptiles, peces, insectos y plantas. El género Orthoreovirus, uno de los 15 géneros reconocidos en la familia Reoviridae, pueden infectar a humanos y a casi todos los mamíferos y aves. La caracterización genómica de los reovirus no se ha adoptado a gran escala debido a la complejidad de obtener secuencias para los 10 segmentos. En este estudio, desarrollamos un método práctico y eficiente para enriquecer las lecturas de secuenciación de reovirus a partir de aislamientos que permite la recuperación del genoma completo utilizando un método de amplificación con un iniciador único junto con la secuenciación de próxima generación. Nos referimos a este protocolo como amplificación de un solo iniciador de reovirus (R-SPA). Estos resultados demuestran que la mayoría de los genes están cubiertos con al menos 500 lecturas por espacio base. Además, el método R-SPA cubre los extremos 5′ y 3′ de cada gene de reovirus. En resumen, este estudio presenta un protocolo de amplificación rápido y universal que produce suficiente ADN complementario de doble cadena y facilita y acelera la secuenciación del genoma completo de los reovirus.