With up to 137 species worldwide, Myotis,— a genus of small, insectivorous bats are an example for understanding biogeographic and evolutionary processes such as intercontinental colonization, diversification, speciation, and convergent adaptive evolution. Species limits and associated distributions, however, remain poorly delineated across significant portions of this diverse group and encompassing a vast geographic range. Here, we explore how diversity is partitioned across this radiation with a focus on Neotropical species of Myotis, using a barcoding approach (706 bp of the mitochondrial DNA gene cytochrome-b) that includes 544 individual sequences (116 newly generated sequences and 428 sequences from GenBank, including outgroups). Single-locus molecular barcoding is useful for identifying cryptic diversity and establishing hypotheses that can guide investigations of species boundaries and phylogenetic relationships, an especially important initial step in assessing poorly characterized, diverse clades. The global phylogeny produced from these data is consistent with the hypothesized monophyly of the New World clade and places the evolutionary relationships of Neotropical species of Myotis within the context of the Palearctic and Nearctic clades. We then explore species boundaries for 25 of the 36 nominal species of Neotropical Myotis, using 3 alternative species delimitation approaches (1 distance-based ABGD [Automatic Barcode Gap Discovery]; and 2 coalescent-based mPTP [multi-rate Poisson Tree Processes], GMYC [Generalized Mixed Yule Coalescent] model). The mPTP (n = 29 species) and ABGD (n = 26) approaches inferred different numbers of species than that recognized by current Neotropical Myotis taxonomy, whereas GMYC (n = 25) inferred the same number of species. In addition to the original 36 Neotropical nominal species currently recognized, we suggest that taxonomic revisions are needed to assess whether M. oxyotus gardneri and M. nigricans osculatii should be elevated to the species level and whether M. dinellii is distinct from M. levis. With the 7 potentially cryptic species identified herein that require further study, the number of Neotropical Myotis may approach 45 species. Taken together, our results suggest that rather than a classic example of a temperate radiation, there may be more species of Myotis in the Neotropics than Nearctic, Afrotropic, Indomalayan, and Oceanian Realms, with only the Palearctic region showing higher species richness.

Con hasta 137 especies en todo el mundo, Myotis, un género de pequeños murciélagos insectívoros, es un ejemplo para comprender los procesos biogeográficos y evolutivos como la colonización intercontinental, la diversificación, la especiación y la evolución adaptativa convergente. La delimitación de especies y sus distribuciones asociadas, sin embargo, son poco conocidas en este diverso grupo, incluyendo gran parte de su rango de distribución. En este estudio exploramos la diversidad genética en la radiación mundial de Myotis con especial interés en las especies de Myotis neotropicales utilizando una aproximación de código de barras (706 pares de bases del gen citocromo-b), el cual incluye 544 secuencias individuales (116 secuencias han sido generadas en este estudio, mientras que 428 secuencias fueron obtenidas de GenBank, incluyendo grupos externos). Estudios de código de barras empleando un solo gen constituyen un paso inicial para la identificación de diversidad críptica y establecer hipótesis preliminares que puedan guiar investigaciones relacionadas a la delimitación de especies límite de especies y sus relaciones filogenéticas, de manera especial en clados diversos que han sido poco caracterizados. Esta filogenia mundial es consistente con previas hipótesis filogenéticas, las cuales sugieren la monofilia del clado de Myotis del Nuevo Mundo, así como establece las relaciones evolutivas de las especies Neotropicales en relación con las especies Neárticas y Paleárticas. Además, se exploró los límites de especies del clado neotropical (25 de 36 especies nominales) utilizando un método de delimitación de especies basado en distancias genéticas (ABGD [Automatic Barcode Gap Discovery]) y dos métodos basados en coalescencia (mPTP [multi-rate Poisson Tree Processes], GMYC [Generalized Mixed Yule Coalescent] model). Los métodos de delimitación mPTP (n = 29 especies) y ABGD (n = 26 especies) infirieron un número diferente en comparación con el número de especies reconocidas por taxonomía actual de Myotis neotropicales, sin embargo, GMYC (n = 25) infirió el mismo número de especies. A parte de las 36 especies nominales actualmente reconocidas, sugerimos nuevas revisiones taxonómicas para confirmar el rango de especie de M. oxyotus gardneri y M. nigricans osculatii, y si M. dinellii es una especie diferente de M. levis. Con siete especies crípticas identificadas en este estudio, el número de especies neotropicales podría aproximarse a las 45 especies. Nuestros resultados sugieren que existen más especies de Myotis en el Neotrópico que en las regiones Neárticas, Afrotropicales, Indomalaya y Oceanía, con la excepción de la región Paleártica.