Please see the PDF version of the back matter.

Please see the PDF version of these advertisements.

Please see the PDF version of the front matter.

Chickens may be infected with three different oncogenic viruses: avian leukosis virus (ALV), reticuloendotheliosis virus (REV), and Marek's disease herpesvirus (MDV). Several epidemiological studies have suggested a link between these viruses and different types of cancer in people working in poultry processing plants and with multiple sclerosis. In this article, we analyze the epidemiological evidence that these viruses are causative agents for human cancer, followed by description of the relevant key characteristics of ALV, REV, and MDV. Finally, we discuss the biological evidence or lack thereof that avian tumor viruses are involved in the etiology of human cancer and multiple sclerosis (MS). The recent primary epidemiologic articles that we reviewed as examples were only hypothesis-generating studies examining massive numbers of risk factors for associations with various imprecise, non-viral-specific outcomes. The studies lacked precise evidence of exposure to the relevant viruses and the statistical methods failed to adjust for the large risks of false-positive claims. ALV subgroups A–D and J have been eradicated in the United States from the pure lines down to the parent stocks by the breeder companies, which have greatly reduced the incidence of infection in layer flocks and broilers. As a consequence, potential exposure of humans to these viruses has greatly diminished. Infection of humans working in processing plants with ALV-A and ALV-B is unlikely, because broilers are generally resistant to infection with these two subgroups. Moreover, these viruses enter cells by specific receptors present on chicken, but not on mammalian, cells. Infection of mammalian cell cultures or animals with ALV-A, ALV-B, and ALV-J has not been reported. Moreover, humans vaccinated with exogenous or endogenous ALV-contaminated vaccines against yellow fever, measles, and mumps did not become antibody- or virus-positive for ALV. The risks for human infection with REV are similarly limited. First of all, REV also has been eradicated from pure lines down to parent stock by breeder companies in the United States. Broilers can still become infected with REV through infection with fowl pox virus containing REV. However, there is no indication that REV can infect human cells. Low levels of antibodies to ALV and REV in human sera have been reported by a few groups. Absorption of sera with chicken antigens reduced the antibody titers, and there was no clear association with contacts with poultry. Possible cross-reactions with human endogenous or exogenous retroviruses were not considered in these publications. MDV is typically associated with infection of chickens, and almost all experimental data show that MDV cannot infect mammalian cells or animals, including nonhuman primates. One study reports the presence of MDV gD DNA in human sera, but this finding could not be confirmed by another group. A Med-line search of the term “gene expression in human cancers” was negative for publications with avian retroviruses or MDV. In conclusion, there is no indication that avian oncogenic viruses are involved in human cancer or MS or even able to infect and replicate in humans.

Estudio Recapitulativo—No existe evidencia de que los virus oncogénicos aviares sean infecciosos para los seres humanos.

Los pollos pueden estar infectados con tres diferentes virus oncogénicos: el virus de la leucosis aviar (con las siglas en inglés ALV), el virus reticuloendoteliosis (REV), y el virus herpes de la enfermedad de Marek (MDV). Varios estudios epidemiológicos han sugerido una relación entre estos virus y los diferentes tipos de cáncer en las personas que trabajan en plantas de procesamiento de aves comerciales y con esclerosis múltiple. En este trabajo, se analiza la evidencia epidemiológica de que estos virus sean agentes causantes de cáncer humano, seguido por la descripción de las principales caract

In the spring of 2012 an outbreak of H7N3 highly pathogenic (HP) avian influenza virus (AIV) occurred in poultry in Mexico. Vaccination was implemented as a control measure, along with increased biosecurity and surveillance. At that time there was no commercially available H7 AIV vaccine in North America; therefore, a recent H7N3 wild bird isolate of low pathogenicity from Mexico (A/cinnamon teal/Mexico/2817/2006 H7N3) was selected and utilized as the vaccine seed strain. In these studies, the potency and efficacy of this vaccine strain was evaluated in chickens against challenge with the 2012 Jalisco H7N3 HPAIV. Although vaccine doses of 256 and 102 hemagglutinating units (HAU) per bird decreased morbidity and mortality significantly compared to sham vaccinates, a dose of 512 HAU per bird was required to prevent mortality and morbidity completely. Additionally, the efficacy of 11 other H7 AIV vaccines and an antigenic map of hemagglutination inhibition assay data with all the vaccines and challenge viruses were evaluated, both to identify other potential vaccine strains and to characterize the relationship between genetic and antigenic distance with protection against this HPAIV. Several other isolates provided adequate protection against the 2012 Jalisco H7N3 lineage, but antigenic and genetic differences were not clear indicators of protection because the immunogenicity of the vaccine seed strain was also a critical factor.

Potencia, eficacia y mapeo antigénico de vacunas con el virus de la influenza aviar H7 contra un virus altamente patógeno H7N3 del año 2012 de México.

En la primavera del 2012 se presentó un brote del virus de influenza aviar de alta patogenicidad subtipo H7N3 en la avicultura de México. La vacunación se llevó a cabo como medida de control, junto con el aumento de la bioseguridad y la vigilancia. En ese momento no había una vacuna con el subtipo H7 disponible comercialmente en América del Norte, por lo tanto, se seleccionó un aislamiento reciente de baja patogenicidad subtipo H7N3 aislado de aves silvestres de México (A/Pato colorado/México/2817/2006 H7N3) y se utilizó como cepa semilla para la vacuna. En estos estudios, se evaluó la potencia y la eficacia de esta cepa de vacuna en pollos contra el desafío con el virus de alta patogenicidad H7N3 de Jalisco del 2012. Aunque las dosis vacunales de 256 y 102 unidades de hemaglutinación (HAU) por ave disminuyeron la morbilidad y la mortalidad de manera significativa en comparación con las aves no vacunadas, se requirieron dosis de 512 unidades hemaglutinantes por ave para prevenir la mortalidad y la morbilidad completamente. Además, se evaluó la eficacia de otras 11 vacunas con el subtipo H7 y se evaluó un mapa antigénico con los datos por la prueba de inhibición de la hemaglutinación con todas las vacunas y los virus de desafío, para identificar otras cepas de vacunas potenciales y para caracterizar la relación entre la distancia genética y antigénica con protección contra este virus de alta patogenicidad. Otros aislamientos confirieron una protección adecuada contra un virus del linaje H7N3 2012 de Jalisco, pero las diferencias antigénicas y genéticas no fueron indicadores claros de protección debido a que la inmunogenicidad de la semilla vacunal fue también un factor crítico.

In this study, the biologic characteristics of one experimental precocious strain of Eimeria acervulina and seven field isolates from different geographic locations in China were compared, and the immune efficacy of two precocious strains against coccidiosis in chickens was assessed to explore their potential use as coccidiosis vaccines. All the different strains were purified by single oocyst separation and their monospecificity was confirmed using E. acervulina-specific PCR assays. The average sizes of E. acervulina oocysts were 18.28–20.19 × 14.09–14.79 µm and the shape indexes were from 1.28 to 1.40. The prepatent periods ranged from 93 to 115 hr, except for the Heyuan precocious strain (HYP; 75 hr). Chickens infected with Huadu field strain (GHD) produced the highest oocyst output whereas HYP induced the lowest level. When inoculated with 50,000 sporulated oocysts or more, the average weight gains of infected chickens were reduced, with apparent clinical symptoms. To assess the immunogenicity of precocious strains HYP and Baoding (BDP), birds were orally immunized and challenged with seven different field strains of E. acervulina. Body weight gain, fecal oocyst output, and gut lesion scores were compared to evaluate their vaccine potential. The results showed that the average body weight gains of chickens in all the vaccinated and challenged groups were higher than those of nonvaccinated and challenged groups. In general, oocyst shedding was reduced 34.39%–95.31% and gut lesion scores decreased 31.03%–86.21% compared with unvaccinated and challenged control chickens. In summary, this study indicated that the precocious strains of E. acervulina could induce a protective immune effect with various responses against coccidiosis caused by different field strains.

Características biológicas de la cepa china precoz de Eimeria acervulina y su eficacia inmune contra diferentes cepas de campo.

En este estudio, se compararon las características biológicas de una cepa precoz experimental de Eimeria acervulina y de siete aislamientos de campo de diferentes ubicaciones geográficas en China y se evaluó la eficacia inmunológica de dos cepas precoces contra la coccidiosis en pollos, para explorar su uso potencial como vacunas contra la coccidiosis. Todas las diferentes cepas se purificaron por separación de oocistos individuales y su monoespecificidad se confirmó usando ensayos de PCR específicos para E. acervulina. El tamaño promedio de los ooquistes de E. acervulina fueron 18.28 a 20.19 × 14.09 a 14.79 micras y los índices de forma fueron 1.28 a 1.40. Los períodos de prepatencia oscilaron desde 93 hasta 115 horas, excepto para las cepas precoces HYP (75 hrs). Los pollos infectados con la cepa de campo Huandu (GHD) produjeron la mayor producción de ooquistes, mientras que la cepa HYP indujo el nivel más bajo. Cuando se inocularon con 50,000 oocistos esporulados o más, las ganancias de peso medio de los pollos infectados se redujeron y mostraron signos clínicos aparentes . Para evaluar la inmunogenicidad de cepas precoces HYP y BDP, las aves fueron inmunizadas por vía oral y se desafiaron con siete cepas de campo diferentes de E. acervulina. La ganancia de peso corporal, la eliminación de ooquistes en heces y las calificaciones de lesiones intestinales fueron comparadas para evaluar su potencial como vacuna. Los resultados mostraron que la ganancia de peso promedio de los pollos en todos los grupos vacunados y desafiados fueron más altas que los grupos no vacunados y desafiados. En general, la diseminación de ooquistes se redujo de 34.39% a 95.31% y la calificación de lesiones intestinales disminuyeron de 31.03% a 86.21% en comparación con los pollos control no vacunados y desafiados. En resumen, este estudio indicó que las cepas precoces de E. acervulina podrían inducir un efecto inmune protector con

Newcastle disease (ND) is a highly contagious viral disease and has been a constant threat to the poultry industry worldwide. In this study, partial sequences of ND virus (NDV) fusion genome collected from some provinces in Iran during 2010–2012 in vaccinated commercial farms were characterized and compared with other NDV sequences. All viruses showed the amino acid sequence 112 RRQKRF117 at the C-terminus of the F2 protein and phenylalanine at the N-terminus of the F1 protein, residue 117. These amino acid sequences were identical to a known virulent motif. The phylogenetic analysis showed that the Iranian ND isolates in this study are closely related to the genotype VIId of class II NDV strains. The emergence and identification of new sublineages provide an insight into the high rate of genetic drift occurring in NDV strains in Iran, and raise many concerns about the efficacy of current ND control measures in the country.

Caracterización molecular y estudio filogenético de virus de la enfermedad de Newcastle aislados en Irán entre los años 2010–2012.

La enfermedad de Newcastle (ND) es una enfermedad viral altamente contagiosa y ha sido una amenaza constante para la industria avícola en todo el mundo. En este estudio se caracterizaron las secuencias parciales del gene de la proteína de fusión de virus de Newcastle obtenidos de algunas provincias de Irán entre los años 2010–2012 de granjas comerciales vacunadas. Dichas secuencias también se compararon con las de otros virus de Newcastle. Todos los virus mostraron la secuencia de aminoácidos 112 RRQKRF117 en el extremo terminal C de la proteína F2 y mostraron fenilalanina en el extremo terminal N de la proteína F1, que es el residuo 117. Estas secuencias de aminoácidos eran idénticas a un motivo que es conocido se asocia con la virulencia. El análisis filogenético demostró que los virus de Newcastle iraníes aislados en este estudio estaban estrechamente relacionados con cepas del genotipo VIId de la clase II. La aparición e identificación de nuevos sublinajes dan una idea de la elevada tasa de derivación genética que está ocurriendo con las cepas de Newcastle en Irán y plantean muchas preocupaciones acerca de la eficacia de las actuales medidas de control contra esta enfermedad en el país.

Skeletal muscle development proceeds from early embryogenesis through marketing age in broiler chickens. While myofiber formation is essentially complete at hatching, myofiber hypertrophy can increase after hatch by assimilation of satellite cell nuclei into myofibers. As the diameter of the myofibers increases, capillary density peripheral to the myofiber is marginalized, limiting oxygen supply and subsequent diffusion into the myofiber, inducing microischemia. The superficial and deep pectoralis muscles constitute 25% of the total body weight in a market-age bird; thus compromise of those muscle groups can have profound economic impact on broiler production. We hypothesized that marginal capillary support relative to the hypertrophic myofibers increases the incidence of microischemia, especially in contemporary high-yield broilers under stressing conditions such as high environmental temperatures. We evaluated the following parameters in four different broiler strains at 39 and 53 days of age when reared under thermoneutral (20 to 25 C) versus hot (30 to 35 C) environmental conditions: capillary density, myofiber density and diameter, and degree of myodegeneration. Our data demonstrate that myofiber diameter significantly increased with age (P ≥ 0.0001), while the absolute numbers of capillaries, blood vessels, and myofibers visible in five 400× microscopic fields decreased (P ≥ 0.0001). This is concomitant with marginalization of vascular support in rapidly growing myofibers. The myofiber diameter was significantly lower with hot environmental temperatures (P ≥ 0.001); therefore, the absolute number of myofibers visible in five 400× microscopic fields was significantly higher. The incidence and subjective degree of myodegeneration characterized by loss of cross-striations, myocyte hyperrefractility, sarcoplasmic vacuolation, and nuclear pyknosis or loss also increased in hot conditions. Differences among strains were not observed.

Evaluación de la densidad de capilares y miofibras en el músculo pectoral superficial en pollos de engorde de rápido crecimiento y de alto rendimiento bajo condiciones aumentadas de estrés por calor.

El desarrollo del músculo esquelético comprende desde de la embriogénesis temprana hasta la edad de la comercialización en los pollos de engorde. Mientras que la formación de las miofibras está prácticamente concluida al momento de la eclosión, se puede incrementar la hipertrofia miofibrilar después de la eclosión debido a la asimilación de los núcleos de las células satélite dentro de las miofibras. Como el diámetro de las miofibras aumenta, la densidad capilar periférica a la miofibras se concentra en los márgenes, lo que limita el suministro de oxígeno y su difusión posterior a las miofibras, lo que induce microisquemia. Los músculos pectorales superficiales y profundos constituyen el 25% del peso corporal total en un ave a la edad de mercado, por lo que el daño de esos músculos puede tener un profundo impacto económico en la producción de pollos de engorde. Se estableció la hipótesis de que el aporte capilar que esta marginalizado relacionado con las miofibras hipertróficas aumenta la incidencia de microisquemia, especialmente en pollos de engorde de alto rendimiento que se encuentran bajo condiciones de estrés, tales como altas temperaturas ambientales. Se evaluaron diferentes parámetros en cuatro líneas diferentes de pollo de engorde a los 39 y 53 días de edad que fueron criados en condiciones de termoneutralidad (20 a 25 C) y en condiciones de calor ambiental (30 a 35 C), los parámetros incluyeron: densidad capilar, diámetro y densidad miofibrilar y el grado de miodegeneration. Los datos demuestran que el diámetro de la miofibra aumentó significativamente con la edad (P ≥ 0.0001), mientras que el número absoluto de capilares, vasos sanguíneos y fibras musculares visibles en cinco campos microscópicos de 40

Two diamond doves (Geopelia cuneata) in a flock of 23 birds housed in an aviary in a zoo in central Japan were found dead as a result of mycobacteriosis. Fecal samples of the remaining doves were positive for mycobacterial infection, and thus they were euthanatized. Clinical signs and gross pathology, including weight loss and sudden death and slight enlargement of the liver and intestine, were observed in a small number of birds (3/23). Disseminated histiocytic infiltration of either aggregates or sheets of epithelioid cells containing acid-fast bacilli, in the absence of caseous necrosis, were observed in different organs of the infected doves, especially lungs (23/23), intestines (9/23), livers (7/23), and hearts (6/23). Mycobacterium sp. was isolated from the livers of three birds (3/23). DNA extracted from frozen liver and formalin-fixed, paraffin-embedded tissues (5/23) were used for amplification of the gene encoding mycobacterial 65-kDa heat shock protein (hsp65). The causative Mycobacterium species was identified by PCR–restriction fragment length polymorphism analysis. Mycobacterium genavense infection was confirmed in three of the diamond doves. Moreover, partial 16S rDNA gene sequencing revealed 100% identity across the three samples tested, and 99.77% nucleotide homology of the isolate sequence to M. genavense. The main route of M. genavense infection in the diamond doves was most likely airborne, suggesting a potential zoonotic risk of airborne transmission between humans and birds.

Brote de infección por Mycobacterium genavense en una parvada de palomas diamante (Geopelia cuneata) en cautiverio.

Dos palomas diamante (Geopelia cuneata) de una parvada de 23 aves alojadas en un aviario en un zoológico del centro de Japón fueron encontrados muertas a consecuencia de micobacteriosis. Las muestras de heces de las palomas restantes fueron positivas para la infección por micobacterias y por lo tanto fueron sacrificadas. Los signos clínicos y la patología general, incluyeron pérdida de peso, muerte súbita y un ligero aumento del hígado y del intestino, que se observaron en un pequeño número de aves (3/23). Se observó infiltración histiocítica diseminada de agregados o láminas de células epiteliales que contenían bacilos ácido-alcohol resistentes, en ausencia de necrosis caseosa, se observaron en los distintos órganos de las palomas infectadas, especialmente en los pulmones (23/23), los intestinos (9/23), el hígado (7/23), y en corazón (6/23). Se aisló Mycobacterium sp. a partir de los hígados de los tres aves (3/23). El ADN extraído de hígado congelados y de tejidos fijados en formalina y embebidos en parafina (5/23) fueron utilizados para la amplificación del gene que codifica a la proteína de choque térmico micobacteriana (hsp65) de 65 kDa. Las especies de Mycobacterium causantes del problema se identificaron mediante análisis de polimorfismo de longitud de los fragmentos de restricción. La infección por Mycobacterium genavense se confirmó en tres de las palomas diamantes. Por otra parte, la secuenciación parcial del gene 16S rADN reveló 100% de identidad a través de las tres muestras analizadas y 99.77% de homología con la secuencia de nucleótidos del aislamiento de M. genavense. La principal vía de infección de M. genavense en las palomas diamante muy probablemente fue por vía respiratoria, lo que sugiere un potencial riesgo transmisión zoonótica por vía aérea entre los humanos y las aves.

The current study investigates the use of irradiated oocysts to protect broiler chicks, raised on litter, from infection with multiple species of Eimeria. In order to determine the optimum radiation dose for each Eimeria species, 1-day-old chicks were immunized with oocysts of Eimeria maxima, Eimeria acervulina, or Eimeria tenella exposed to gamma radiation ranging from 0–500 Gy. The litter oocyst counts at 7 days postimmunization, and the effect on weight gain following a challenge infection, decreased with an optimum dose between 150–200 Gy. Based on this finding, broiler chicks were immunized with a mixture of E. maxima, E. acervulina, and E. tenella that had been exposed to 150 or 200 Gy. This resulted in more than a 100-fold reduction in litter oocyst counts and significant protection from a challenge infection, as measured by improved weight gain and feed conversion ratio (FCR). Immunization of birds with oocysts receiving 200 Gy was less effective in providing protection from a challenge infection. An additional formulation of vaccines containing two different oocyst doses of the three species that had been irradiated with 150 Gy were evaluated in their ability to attenuate oocyst output and convey protection to challenge. Results were similar with both high and low numbers of irradiated oocysts. Immunized chicks shed less oocysts at 7 days postimmunization and were protected from negative effects of challenge infection as measured by FCR, changes in weight gain, lesion scores, and measurement of body composition. However, the level of protection was somewhat less than that achieved by immunization with nonirradiated oocysts. The overall conclusion is that an irradiated oocyst vaccine developed in this study can effectively protect chicks that are raised on litter from challenge infection with multiple species of Eimeria, comparable to vaccines with virulent or precocious strains.

Evaluación de una vacuna experimental con ooquistes irradiados en la protección de pollos de engorde contra la coccidiosis aviar.

El presente estudio investigó el uso de ooquistes irradiados para proteger pollos de engorde criados sobre cama, contra la infección con múltiples especies de Eimeria. Con el fin de determinar la dosis óptima de radiación para cada especie de Eimeria, pollitos de un día de edad fueron inmunizados con ooquistes de Eimeria maxima, Eimeria acervulina, o de Eimeria tenella expuestos a la radiación gamma que fue desde 0 hasta 500 Gy. Los conteos de ooqistes en la cama a los siete días después de la inmunización y el efecto sobre el aumento de peso después del desafío disminuyeron con una dosis óptima de entre 150–200 Gy. Con base en este hallazgo, se inmunizaron pollos de engorde con una mezcla de E. maxima, E. acervulina, y de E. tenella que habían sido expuestas a 150 o 200 Gy. Esto dio lugar a una reducción de más de 100 veces en los recuentos de ooquistes en la cama y a una protección significativa contra el desafío, tal como se determinó por la mejora de la ganancia de peso y de la conversión alimenticia (FCR). La inmunización de las aves con ooquistes que recibieron 200 Gy fue menos eficaz en la protección contra el desafío. Una formulación adicional de vacunas que contenían dos dosis diferentes de ooquistes de las tres especies que habían sido irradiados con 150 Gy fue evaluada en su capacidad para atenuar la producción de ooquistes y para transmitir protección contra el desafío. Los resultados fueron similares con números de ooquistes irradiados altos y bajos. Pollos inmunizados eliminaron menos ooquistes a los siete días después de la vacunación y estuvieron protegidos contra los efectos negativos del desafío, determinados por la conversión alimenticia, por los cambios en la ganancia de peso, por las puntuaciones de lesiones y por la medició

Real-time quantitative reverse transcriptase–polymerase chain reaction (qRT-PCR) assays have been used to detect the presence of challenge virus when the efficacy of infectious bronchitis virus (IBV) vaccine against field viruses is being experimentally evaluated. However, federal guidelines for licensing IBV vaccines indicate that challenge-virus detection following vaccination is to be conducted in embryonated eggs. In this study, we examined qRT-PCR data with the use of universal and type-specific primers and probe sets for IBV detection and compared those data with challenge-virus detection in embryonated eggs to determine if the two methods of evaluating vaccine efficacy are comparable. In addition, we tested the qRT-PCR assays on thermocyclers from two different manufacturers. We found the universal IBV primers and probe set to be comparable to challenge-virus detection in embryonated eggs. However, for some IBV types (Mass41 and Conn on the SmartCycler II and Ark, Mass41, Conn, and GA98 on the ABI 7500) the qRT-PCR assay was more sensitive than virus detection in embryonated eggs. This may simply be due to the universal IBV qRT-PCR assay being more sensitive than virus detection in eggs or to the assay detecting nucleic acid from nonviable virus. This finding is important and needs to be considered when evaluating challenge-virus detection for vaccination and challenge studies, because qRT-PCR could potentially identify positive birds that would otherwise be negative by virus detection in embryonated eggs; thus it could lead to a more stringent measure of vaccine efficacy. We also found that the IBV type-specific primers and probe sets designed in this study were in general less sensitive than the universal IBV primers and probe set. Only the Ark-DPI–specific assay on the SmartCycler II and the Ark-DPI–, Mass41–, and DE072/GA98– (for detection of GA98 virus only) specific assays on the ABI 7500 were comparable in sensitivity to virus detection in eggs. We found that a number of variables, including the virus type examined, primers and probe efficiency and stability, and assay conditions, including thermocycler platform, can affect the data obtained from qRT-PCR assays. These results indicate that qRT-PCR assays can be used to detect IBV challenge virus, but each assay, including the assay conditions and thermocycler, should be individually evaluated if those data are expected to be comparable to virus detection in embryonated eggs.

Detección del virus de la bronquitis infecciosa mediante métodos de transcripción reversa y PCR en tiempo real cuantitativos y su correlación con la detección del virus en huevos embrionados.

Los ensayos de transcripción reversa y reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (qRT-PCR) se han utilizado para detectar la presencia de virus de desafío cuando se evalúa experimentalmente la eficacia de virus vacunales de la bronquitis infecciosa (IBV) contra virus de campo. Sin embargo, los lineamientos federales para la concesión de licencias de vacunas contra la bronquitis infecciosa indican que la detección del virus de desafío después de la vacunación se debe llevar a cabo en huevos embrionados. En este estudio se analizaron los datos por qRT-PCR con el uso de conjuntos de iniciadores y de sondas universales y específicos para la detección del virus de bronquitis y se compararon estos datos con la detección del virus en huevos embrionados para determinar si ambos métodos son comparables en la evaluación de la eficacia de las vacunas. Además, se analizaron los ensayos de qRT-PCR en termocicladores de dos fabricantes diferentes. Se encontró que los iniciadores y sondas universales para bronquitis infecciosa son comparables a la detección de virus en huevos embrionados. Sin embargo, para algunos tipos del virus de bronquitis (Mass41 y Conn con SmartCycler II y Ark, Mass41, Conn, y GA98 con el ABI 7500) el ensayo de qRT-PCR fue más

During late 2010 and early 2011, an unusual problem of lameness and swollen hock joints in commercial turkeys was reported in the upper Midwest, which continues to this day. The disease caused substantial economic losses to turkey producers. Reovirus was isolated from tendons and joint fluids of lame turkeys submitted to the Minnesota Veterinary Diagnostic Laboratory. This study was undertaken to develop a TaqMan real-time reverse transcription-PCR (rRT-PCR) assay for the early detection of turkey reoviruses (both enteric and lameness strains). A primer probe set was designed from the conserved region of the S4 segment of the turkey reovirus genome. The newly developed rRT-PCR was specific for the detection of turkey reoviruses. The detection limit of this assay was 10 genome copies per reaction. For the TARV-MN4 strain of turkey arthritis reovirus, one 50% tissue culture infectious dose was equivalent to 11.6 ± 0.2 genome copies. The highest coefficient of variation for intraexperimental and interexperimental variability was 0.08 and 0.06, respectively, indicating the reproducibility of the assay. This new test should be useful for the detection of turkey enteric and arthritis reoviruses.

Método de transcripción reversa y PCR en un solo paso para la detección de reovirus de pavos.

Durante finales del año 2010 y principios del 2011, se informó de un problema poco común de cojera e inflamación de corvejones en pavos comerciales en el Medio Oeste de los Estados Unidos, que continúa hasta este momento. La enfermedad ha causado substanciales pérdidas económicas a los productores de pavo. Se aisló un reovirus de los tendones y de los fluidos de las articulaciones de los pavos con cojera enviados al Laboratorio de Diagnóstico Veterinario de Minnesota. Este estudio se realizó para desarrollar un método de transcripción reversa y PCR en tiempo real (rRT-PCR) con sondas TaqMan para la detección temprana de los reovirus de pavo (cepas entéricas y cepas causantes de cojera). Se diseñó un conjunto de iniciadores para la región conservada del segmento S4 del genoma del reovirus de pavo. El método de rRT-PCR recientemente desarrollado era específico para la detección de reovirus de pavo. El límite de detección de este ensayo fue de 10 copias de genoma por reacción. Para la cepa TARV-MN4 de reovirus de pavo causante de artritis, una doses infectante 50% en cultivo de tejidos fue equivalente a 11.6 ± 0,2 copias del genoma. Los mayores coeficientes de variación para la variabilidad intraexperimental e interexperimental fueron de 0.08 y 0.06, respectivamente, indicando la reproducibilidad del ensayo. Esta nueva prueba puede ser útil para la detección de reovirus de pavos entéricos y causantes de artritis.

The effects of Eimeria (EM) and Clostridium perfringens (CP) challenges on the mRNA levels of genes involved in mucin (Muc) synthesis (Muc2, Muc5ac, Muc13, and trefoil family factor-2 [TFF2]), inflammation (tumor necrosis factor alpha [TNF-α] and interleukin-18 [IL-18]), and metabolic processes (cluster of differentiation [CD]36) in the jejunum of broilers were investigated. Two parallel experiments involving 1) EM challenge and 2) EM and CP challenges were conducted. The first experiment was a 2 × 2 study with 12 birds per treatment (N  =  48) involving fishmeal substitution (25%) in the diet (FM) and EM challenge. The treatments were: Control (FM−, EM−), Fishmeal (FM , EM−), EM challenge (FM−, EM ), and fishmeal substitution and EM challenge (FM , EM ). The second experiment was a 2 × 2 × 2 experiment with six birds per treatment (N  =  48) involving fishmeal (FM−, FM ), Eimeria (EM−, EM ), and C. perfringens (CP−, CP ). In both arms of the study, male broilers were given a starter diet for the whole period of 16 days, except those assigned to FM , where 25% of the starter ration was replaced with fishmeal from days 8 to 14. EM inoculation was performed on day 9 and CP inoculation on days 14 and 15. The EM challenge birds were euthanatized for sampling on day 13; postmortem examination and sampling for the Eimeria plus C. perfringens challenge arm of the study were on day 16. In the Eimeria challenge arm of the study, fishmeal supplementation significantly suppressed the mRNA levels of TNF-α, TFF2, and IL-18 pre-CP inoculation but simultaneously increased the levels of Muc13 and CD36 mRNAs. Birds challenged with Eimeria exhibited increased mRNA levels of Muc13, Muc5ac, TNF-α, and IL-18. In the Eimeria and C. perfringens challenge arm, birds exposed to EM challenge exhibited significantly lower mRNA levels of Muc2 and CD36. The mRNA levels of CD36 were also significantly suppressed by CP challenge. Our results showed that the transcription of mucin synthesis genes in the jejunum of broilers is modulated by fishmeal inclusion in the diet. Furthermore, we show for the first time suppression of CD36 mRNA levels in the intestine of broilers challenged with Eimeria or C. perfringens.

Niveles de ARN mensajero de genes de la mucina en pollos desafiados con Eimeria y/o con Clostridium perfringens.

Los efectos del desafíos por Eimeria (EM) y por Clostridium perfringens (CP) en los niveles de ARN mensajero de los genes implicados en la síntesis de la mucina (Muc2, Muc5ac, Muc13 y del factor 2 de la familia trefoil [TFF2]), en la inflamación (factor de necrosis tumoral alfa [TNF-α] y la interleucina 18 [IL-18]) y de los procesos metabólicos (grupo de diferenciación [CD] 36) en el yeyuno de pollos de engorde fueron investigados. Se realizaron dos experimentos paralelos que implicaron 1) desafío con Eimeria y 2) desafíos con Eimeria y C. perfringens. El primer experimento fue un estudio de 2 × 2 con 12 aves por tratamiento (N  =  48) que implica la sustitución de la harina de pescado (25%) en la dieta (FM) y el desafío con Eimeria. Los tratamientos fueron: control (FM-, EM-), Harina de pescado (FM , EM-), desafío con Eimeria (FM-, EM ) y la sustitución de la harina de pescado con desafío con Eimeria (FM , EM ). El segundo experimento fue un experimento 2 × 2 × 2 con seis aves por tratamiento (N  =  48) que incluyó harina de pescado (FM, FM ), Eimeria (EM- EM ) y C. perfringens (CP-, CP ). En ambas partes del estudio, a los pollos machos se les dio una dieta de iniciación para todo el período de 16 días, excepto a los asignados al grupo FM , donde se sustituyó el 25% de la ración de iniciación con harina de pescado de los días 8 a 14. El desafío con Eimeria se realizó al día 9 y la inoculaci

Animals are exposed to various environmental stresses every day, including the stress associated with living in cold temperatures. The aim of this study was to investigate the possible mechanisms of interaction between lipid metabolism and inflammation induced by cold stress in the livers of chickens. Fifteen-day-old male chicks were randomly allocated into 12 groups (10 chickens per group). After exposure of the chickens to the cold stress, cholesterol fractionation was used to examine high-density lipoprotein (HDL) and low-density lipoprotein (LDL) concentrations. Aminotransferase activities were examined with the use of the aspartate transaminase (AST) and alanine transaminase (ALT) assay. The AMP-activated protein kinase α–proliferator-activated receptor α (AMPKα–PPARα) pathway genes (AMPKα1, AMPKα2, PPARα, carnitine palmitoyltransferaseI [CPTI], acetyl-CoA carboxylase [ACC]) and inflammatory cytokines (prostaglandin E synthase [PGEs], inducible nitric oxide synthase [iNOS], heme oxygenase-1 [HO-1], nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B cells [NF-κ;B], cyclooxygenase-2 [COX-2], and TNF-α-like factor [LITAF]) were also measured. The results showed that during the response to cold stress, serum LDL and HDL cholesterol concentrations increased. Histopathologic analyses provided evidence that liver tissues were seriously injured in the chickens exposed to the cold stress. Serum aminotransferase activities were also increased in the group of animals exposed to the cold stress. Additionally, the expressions of AMPKα–PPARα pathway genes and inflammatory cytokine genes were significantly increased in the animals exposed to cold temperatures. These results suggested that increased inflammation was a feature associated with a lipid-metabolism disorder in the livers of chickens exposed to cold stress.

Efecto del estrés por frío en la expresión del mecanismo AMPKα-PPARα y de los genes pro-inflamatorios.

Los animales están expuestos a varios tipos de estrés ambiental todos los días, incluyendo el estrés asociado con temperaturas frías. El objetivo de este estudio fue investigar los posibles mecanismos de interacción entre el metabolismo de los lípidos y la inflamación inducidos por el estrés por frío en el hígado del pollo. Se asignaron al azar quince pollitos machos de un día de edad en 12 grupos (10 pollos por grupo). Después de la exposición de los pollos al estrés por frío, se utilizó el método de fraccionamiento del colesterol para analizar las concentraciones de lipoproteínas de alta densidad (HDL) y de lipoproteínas de baja densidad (LDL). Las actividades de la aminotransferasa fueron examinadas mediante los ensayos de la aspartato transaminasa (AST) y de la transaminasa de alanina (ALT). También se determinaron los genes del mecanismo del receptor α activado por la proteína quinasa α proliferadora y activada por AMP (AMPKα1, AMPKα2, PPARα, palmitotransferasa de carnitina [CPTI], la carboxilasa de acetil-CoA [ACC]) y las citoquinas inflammatorias (protaglandina E sintetasa [PGEs], la sintetasa de óxido nítrico inducible [iNOS], la oxigenasa-1 del grupo heme [HO-1], el factor nuclear potenciador de las cadenas ligeras kappa de las células B activadas [NF-κ;B], ciclooxigenasa-2 [COX-2], factores similares al factor de necrosis tumoral alfa [LITAF]). Los resultados mostraron que durante la respuesta al estrés por frío, se incrementaron las concentraciones séricas de colesterol LDL y HDL. Los análisis histopatológicos proporcionaron evidencia que los tejidos hepáticos resultaron gravemente lesionados en los pollos expuestos al estrés por frío. La actividad de las aminotransferasas séricas también se incrementó en el grupo de animales expuestos al estrés por frío. Además, las expresiones de genes de la vía AMPKα- PPARα y de los genes de citoquinas inflamatorias fueron significativamente superiores en los animales expuestos a temperaturas frías. Estos res

Several studies have shown differences in the course of histomonosis, the infection with the trichomonad parasite Histomonas meleagridis, in different chicken breeds. In the present study, 10 specific-pathogen-free (SPF) layer-type (LT) chickens and twelve SPF meat-type (MT) chickens were infected intracloacally with 200,000 H. meleagridis trophozoites. One and two weeks postinfection (p.i.), three birds of each group were euthanatized. The remaining birds were euthanatized 3 wk p.i. Infected birds showed severe gross lesions typical for histomonosis in ceca at the first and second week p.i., while livers showed necrotic foci at 2 and 3 wk p.i., but only very rarely at 1 wk p.i. Differences between groups in the severity of lesions were statistically insignificant. In histopathology, LT chickens showed a significantly more-severe necrosis and ablation of the cecal epithelium 1 wk p.i. Parasites without inflammation were also found in most investigated spleens and lungs but only in a few kidneys. Investigation of these organs for histomonal DNA by real-time PCR confirmed these results. In addition, the humoral immune response against histomonal actinin 1 and 3 was measured by an ELISA. The humoral immune response against actinin 1 started sooner and was significantly higher in LT chickens than in MT chickens. In conclusion, the results of the present study suggest that the genetic background of the birds influences the reaction to infection with H. meleagridis.

Patogénesis de la histomoniasis en aves libres de patógenos específicos ligeras y pesadas infectados experimentalmente.

Varios estudios han mostrado diferencias en el curso de la histomoniasis en diferentes razas de pollo, que es la infección con el parásito Histomonas meleagridis del orden Trichomonadida. En el presente estudio, diez aves ligeras libres de patógenos específicos (SPF) (LT) y doce pollos libres de patógenos específicos tipo de engorde (MT) se infectaron intracloacalmente con 200,000 trofozoitos de H. meleagridis. Una y dos semanas después de la infección (p.i.), se sacrificaron tres aves de cada grupo. Las aves restantes fueron sacrificadas a las tres semanas después de la infección. Las aves infectadas mostraron lesiones macroscópicas típicas graves de histomonosis en los sacos ciegos en la primera y segunda semana después de la inoculación, mientras que los hígados mostraron focos necróticos a las dos y tres semanas después de la inoculación, pero sólo en muy raras ocasiones en la primera semana después de la inoculación. Las diferencias entre los grupos en la gravedad de las lesiones no fueron estadísticamente significativas. A la histopatología, las aves ligeras mostraron una necrosis significativamente más grave y desprendimiento del epitelio cecal una semana después de la infección. También se encontraron parásitos sin inflamación en la mayoría de los bazos investigados y en los pulmones, pero sólo en unos pocos riñones. La investigación de estos órganos mediante PCR en tiempo real para detectar ADN de histomonas confirmó estos resultados. Además, la respuesta inmune humoral contra actinina 1 y 3 de histomonas se midió mediante una prueba de ELISA. La respuesta inmune humoral contra actinina 1 comenzó antes y fue significativamente mayor en pollos ligeros que en los pollos de tipo para carne. En conclusión, los resultados del presente estudio sugieren que la genética de las aves influye en la reacción a la infección con H. meleagridis.

Clostridia represents a group of anaerobic spore-forming bacteria ubiquitous in the poultry environment. They are widely distributed in soil and survive for many years as highly resistant, inactive spores. They enter the body through wounds and contaminated feed as active bacteria or spores. Multiplication of clostridial bacteria occurs only in the absence of oxygen or in environments with very low concentrations of oxygen. During active multiplication, the clostridial organisms produce several toxins that are responsible for most of the clinical signs seen in clostridial diseases. Immunosuppression is a problem for the poultry industry. In modern, intensive poultry-rearing conditions, stress due to high population densities pose a considerable challenge for the immune system, and infectious agents can exploit this situation to cause disease. Immunosuppression may predispose turkeys to clostridial infection, resulting in clostridial dermatitis and mortality. The purpose of this study was to determine whether immunosuppression predisposes turkeys to clostridial infection and causes clostridial dermatitis. We immunosuppressed 10-wk-old turkey poults with dexamethasone. The birds immunosuppressed and not immunosuppressed were then challenged with Clostridium perfringens, Clostridium septicum, or both and examined for the development of clostridial dermatitis. The dexamethasone-treated birds were found to be more susceptible to C. perfringens/C. septicum challenge and developed clostridial dermatitis than the no-dexamethasone-treated birds through the subcutaneous route. However, oral inoculation of the same agents did not cause any dermatitis lesions in either of the groups.

Efectos de la inmunodepresión por dexametasona en la dermatitis clostridial de los pavos.

Las bacterias del género Clostridium representan un grupo de bacterias anaerobias que forman esporas y que son ubicuas en los ambientes avícolas. Están ampliamente distribuidas en el suelo y sobreviven durante muchos años como esporas inactivas, altamente resistentes. Entran en el cuerpo a través de heridas y alimentos contaminados en forma de bacterias activas o esporas. La multiplicación de las bacterias clostridiales sólo se produce en ausencia de oxígeno o en ambientes con concentraciones muy bajas del mismo. Durante la multiplicación activa, los organismos clostridiales producen varias toxinas que son responsables de la mayoría de los signos clínicos observados en las enfermedades clostridiales. La inmunosupresión es un problema para la industria avícola. Bajo las condiciones de crianza intensiva modernas, el estrés debido a la alta densidad de población plantea un reto considerable para el sistema inmune y los agentes infecciosos pueden aprovechar esta situación para causar enfermedades. La inmunodepresión puede predisponer a los pavos a la infección por clostridios y causar dermatitis clostridial y mortalidad. El propósito de este estudio fue determinar si la inmunosupresión predispone a los pavos a la infección por clostridios y si es causa dermatitis por clostridios. Se inmunodeprimieron pavipollos de 10 semanas de edad con dexametasona. Posteriormente, aves inmunodeprimidas y normales fueron expuestas a Clostridium perfringens, a Clostridium septicum, o a ambos y se examinaron para el desarrollo de la dermatitis clostridial. Se encontró que las aves tratadas con dexametasona eran más susceptibles al desafío por C. perfringens/C. septicum y desarrollaron dermatitis clostridial a diferencia de las aves que no fueron tratadas con dexametasona por vía subcutánea. Sin embargo, la inoculación oral de los mismos agentes no causó lesiones de dermatitis en ninguno de los grupos.

The vaccination planning tool for avian influenza supports evidence-based planning and preparedness for vaccinating poultry at national and regional levels. This study describes the development, testing, and application of a vaccination planning tool for H5N1 highly pathogenic avian influenza (HPAI) used in two South Asian countries. The tool consists of eight planning clusters, 37 planning elements, and 303 referenced planning criteria. Both countries attained a score of 52% among planning clusters as a measure of preparedness. The highest and lowest planning cluster scores included vaccination strategies and financial readiness, respectively. The comprehensive vaccination program was identified as the most-useful planning cluster for assessing preparedness, and 86% of participants indicated that the objectives of the planning tool were achieved. Based on these results, the planning tool provides a structured approach for decision makers to develop their national vaccination program for HPAI as part of an overall strategy for the progressive reduction and control of endemic influenza viruses in poultry.

Desarrollo y aplicación de una herramienta de planificación para la vacunación contra la influenza aviar.

La herramienta de planificación de la vacunación para la influenza aviar apoya la planificación basada en la evidencia y en la preparación para la vacunación en avicultura a nivel nacional y regional. Este estudio describe el desarrollo, evaluación y aplicación de una herramienta de planificación de la vacunación contra el subtipo H5N1 del virus de la influenza aviar altamente patógena que se utiliza en dos países del sur de Asia. La herramienta consta de ocho grupos de planificación, 37 elementos de planificación, y 303 criterios de planificación con referencias. Ambos países alcanzaron una puntuación de 52% entre los grupos de planificación como medida de preparación. Los puntajes más altos y más bajos de los grupos de planificación corresponden a las estrategias de vacunación y la preparación financiera, respectivamente. El programa de vacunación integral fue identificado como el grupo de planificación más útil para evaluar la preparación y el 86% de los participantes indicó que se habían alcanzado los objetivos de la herramienta de planificación. Con base en estos resultados, la herramienta de planificación proporciona un enfoque estructurado para la toma de decisiones para desarrollar su programa nacional de vacunación contra la influenza aviar de alta patogenicidad, como parte de una estrategia global para la reducción progresiva y el control de los virus de influenza endémicos en la avicultura.

Aquatic habitats play a critical role in the transmission and maintenance of low-pathogenic avian influenza (LPAI) viruses in wild waterfowl; however, the importance of these environments in the ecology of H5N1 highly pathogenic avian influenza (HPAI) viruses is unknown. In laboratory-based studies, LPAI viruses can remain infective for extended durations (months) in water, but the persistence is strongly dependent on water conditions (temperature, salinity, pH) and virus strain. Little is known about the stability of H5N1 HPAI viruses in water. With the use of an established laboratory model system, the persistence of 11 strains of H5N1 HPAI virus was measured in buffered distilled water (pH 7.2) at two temperatures (17 and 28 C) and three salinities (0, 15,000, and 30,000 ppm). There was extensive variation between the 11 H5N1 HPAI virus strains in the overall stability in water, with a range similar to that which has been reported for wild-bird–origin LPAI viruses. The H5N1 HPAI virus strains responded similarly to different water temperatures and salinities, with all viruses being most stable at colder temperatures and fresh to brackish salinities. These results indicate that the overall stability and response of H5N1 HPAI viruses in water is similar to LPAI viruses, and suggest there has been no increase or loss of environmental survivability in H5N1 HPAI viruses.

Nota de Investigación—La supervivencia en el agua de virus euroasiáticos de la influenza aviar altamente patógenos H5N1 varía entre las cepas.

Los hábitats acuáticos juegan un papel fundamental en la transmisión y en el mantenimiento de la influenza aviar de baja patogenicidad (con las siglas en inglés LPAI) en aves acuáticas silvestres, sin embargo, la importancia de estos ambientes en la ecología del virus H5N1 de la influenza aviar altamente patógena (con las siglas en inglés HPAI) es desconocida. En estudios de laboratorio, los virus de baja patogenicidad pueden permanecer infectantes durante períodos prolongados (meses) en el agua, pero la persistencia depende fuertemente de las condiciones del agua (temperatura, salinidad, pH) y la cepa del virus. Poco se conoce acerca de la estabilidad de los virus de influenza aviar altamente patógenos H5N1 en el agua. Con el uso de un sistema modelo de laboratorio establecido, se midió la persistencia de 11 cepas de virus de influenza altamente patógenos H5N1 en agua destilada amortiguada (pH 7.2) con dos temperaturas (17 y 28 C) y con tres niveles de salinidad (0, 15,000 y 30,000 ppm). Hubo una amplia variación entre las 11 cepas de virus H5N1 de la influenza aviar altamente patógena con respecto a la estabilidad general en el agua, con un rango similar a lo que se ha reportado con los virus de baja patogenicidad de aves silvestres. Las cepas del virus H5N1 de la influenza aviar altamente patógenos respondieron de manera similar a las diferentes temperaturas del agua y salinidad, y se observó que todos los virus eran más estables a temperaturas más frías y en agua dulce en comparación con salinidades salobres. Estos resultados indican que la estabilidad global y la respuesta de los virus H5N1 de la influenza aviar de alta patogenicidad en el agua es similar a los virus de baja patogenicidad y sugieren que no ha habido un aumento o pérdida de la capacidad de supervivencia en el medio ambiente con los virus altamente patógenos H5N1.

Rotaviruses are segmented double-stranded RNA viruses that cause gastroenteritis in mammals and birds. Here we describe the first partial nucleotide sequences of the structural protein VP6 from the genomes of group F rotaviruses that were detected in 5 out of 53 fecal samples (9.43%) from healthy broilers from Brazilian poultry farms based on reverse-transcriptase–PCR with primers designed for this study. The findings support the development of molecular detection systems, which can be used for the assessment of the distribution of rotavirus F in birds, their potential involvement in diseases, and their impact on poultry health.

Nota de Investigación—Descripción de un rotavirus F en pollos de granjas avícolas brasileñas.

Los rotavirus son virus de genoma de ARN segmentado y de doble cadena que causan gastroenteritis en los mamíferos y en las aves. Aquí se describen las primeras secuencias de nucleótidos parciales de la proteína estructural VP6 de los genomas de rotavirus del grupo F que se detectaron en 5 de 53 muestras fecales (9.43%) en pollos de granjas avícolas de Brasil, mediante transcriptasa reversa y PCR con iniciadores diseñados en este trabajo. Los resultados apoyan el desarrollo de sistemas de detección molecular, que pueden ser utilizados para la evaluación de la distribución de rotavirus F en las aves, su papel potencial en enfermedades y su impacto en la salud de las aves comerciales.

The highly pathogenic H5N1 avian influenza virus (A/H5N1) devastated the poultry industry and posed a serious health threat. Cleaning and disinfection are essential parts of preventative and postoutbreak management of A/H5N1 infections in poultry. In this preliminary study, we used suspension and carrier tests to evaluate the impact of concentration, time of exposure, surface porosity, and organic matter on the ability of four commercial chemical disinfectants to inactivate two A/H5N1 viruses of clade 2.2.1 isolated in 2006 and 2010 from broiler flocks in Egypt. Viruses were incubated with 0.5%, 1%, and 2% of formalin, glutaraldehyde, TH4®, and Virkon® S for 15, 30, 60, and 120 min at room temperature (22 ± 2 C). In suspension tests, in the absence of organic matter, all disinfectants, at each concentration, except Virkon S 0.5%, effectively inactivated virus suspensions after a 15-min exposure time. In the presence of organic matter, the use of low concentrations of formalin (0.5%), glutaraldehyde (0.5%), or Virkon S (0.5%) was not sufficient to inactivate the viruses after 15 min. In gauze carrier tests, only formalin at any concentration for 15 min was sufficient to inactivate the viruses, whereas different concentrations or exposure times were required for glutaraldehyde (0.5% for 60 min), TH4 (0.5% for 30 min), and Virkon S (0.5% for 60 min or 1% for 30 min). In wood carrier tests, total inactivation of the virus was obtained at concentrations of 0.5% for 30 min (formalin and TH4) or 60 min (glutaraldehyde and Virkon S). This study emphasizes the need to use high concentrations of and/or extended time of exposure to disinfectants for efficient inactivation of A/H5N1, particularly in the presence of organic matter or different surfaces, which are common in poultry operations. In addition, it seemed that the virus isolated in 2010 was more resistant to disinfectants than the isolate from 2006 when wood was used as a carrier.

Nota de Investigación—Inactivación in vitro de dos virus de influenza aviar subtipo A/H5N1 egipcios por cuatro desinfectantes químicos comerciales.

El virus de la influenza aviar altamente patógeno H5N1 (A/H5N1) devastó a la industria avícola y representa una amenaza grave para la salud. La limpieza y desinfección son parte esencial del manejo preventivo y posterior a brotes por el subtipo A/H5N1 en avicultura. En este estudio preliminar, se utilizaron pruebas de suspensión y de acarreadores para evaluar el impacto de la concentración, el tiempo de exposición, la porosidad de la superficie y presencia de materia orgánica en la capacidad de cuatro desinfectantes químicos comerciales para inactivar dos virus de influenza aviar A/H5N1 de clado 2.2.1 aislados en el año 2006 y en el año 2010 procedentes de parvadas de pollos de engorde en Egipto. Los virus se incubaron con 0.5%, 1%, y 2% de formalina, glutaraldehído, TH4® y Virkon® S durante 15, 30, 60 y 120 minutos a temperatura ambiente (22±2 C). En las pruebas de suspensión, en ausencia de materia orgánica, todos los desinfectantes, en cada concentración, excepto Virkon S en una concentración de 0.5%, inactivó de manera efectiva las suspensiones de virus después de un tiempo de exposición de 15 min. En presencia de materia orgánica, el uso de bajas concentraciones de formalina (0.5%), glutaraldehído (0.5%), o Virkon S (0.5%) no fue suficiente para inactivar los virus después de 15 minutos. En las pruebas utilizando gasa como acarreadores, sólo la formalina en cualquier concentración durante 15 minutos fue suficiente para inactivar los virus, mientras que no se requirieron diferentes concentraciones o tiempos de exposición para glutaraldehído (0.5% durante 60 minutos), TH4 (0.5% durante 30 minutos) y Virkon S (0.5% durante 60 minutos o al 1% durante 30 minutos). En las pruebas utilizando madera como acarreador, la inactivación total del virus se obtuvo en concentraciones de 0.5%

Tibial dyschondroplasia (TD) is a skeletal disease characterized by the disruption of endochondral bone formation in avian species. The aim of this study was to determine the expression of Matrilin-3 and Cyclin-I genes in chicken growth plate during impairment and recovery from TD. Gene expressions were analyzed by polymerase chain reaction, and proteins by immunohistochemistry and in situ hybridizations. Expression of genes encoding Matrilin-3 and Cyclin-I were diminished with parallel decrease in proteins during TD, with fewer signs of cartilage cell differentiation. In contrast, there was an increase in mRNA expressions and protein levels of both genes during the recovery phase. These findings suggest that the Matrilin-3 and Cyclin-I genes also play a role in chondrocyte differentiation during the impairment and recovery of growth plate in TD.

Nota de Investigación—Expresión de genes que codifican para matrilin-3 y ciclina-I durante el deterioro y recuperación de la placa de crecimiento de pollos con discondroplasia de en la tibia.

La discondroplasia tibial (TD) es una enfermedad del esqueleto que se caracteriza por la interrupción de la formación de hueso endocondral en especies aviares. El objetivo de este estudio fue determinar la expresión de los genes para matrilin-3 y de ciclina-I en la placa de crecimiento de pollos durante el deterioro y la recuperación por discondroplasia tibial. Se analizó la expresión de los genes mediante la reacción en cadena de la polimerasa, y las proteínas se analizaron mediante técnicas de inmunohistoquímica e hibridación in situ. La expresión de los genes que codifican para matrilin-3 y ciclina-I disminuyeron de manera paralela con las proteínas durante la discondroplasia tibial con algunos signos de diferenciación de las células del cartílago. En contraste, hubo un aumento en la expresión de ARN mensajero y de los niveles de proteína de ambos genes durante la fase de recuperación. Estos hallazgos sugieren que los genes matrilin-3 y ciclina-I también juegan un papel en la diferenciación de condrocitos en el deterioro y recuperación de la placa de crecimiento en la discondroplasia tibial.

Between 2006 and 2011 a series of disease conditions characterized by raised mortality and liver disorders occurred in turkey breeder flocks and in meat turkey flocks in Germany. The flocks were between 12 and 23 wk of age, and mostly hens were affected. Clinical signs were nonspecific and accompanied by mortality varying between 1% and 7%. Affected birds displayed swollen livers that were marbled with black and red spots and yellowish areas. The pericardium was filled with an amber fluid, and the coronary groove was extensively filled with fat. Spleens were swollen, and a serous fluid that seemed to leak from the liver was present in the body cavity. Histopathological findings in all but one case included fatty degeneration of hepatocytes with parenchymal collapse and associated hemorrhages. Some animals showed cholangitis and hepatitis with intranuclear inclusion bodies. In three cases with breeders, electron microscopy detected virus particles that were between 23 and 30 nm and similar to parvo- or picornavirus. In addition, picornavirus RNA was detected in the livers of one meat turkey flock. Investigations by PCR for circovirus, polyomavirus parvovirus, and aviadenovirus yielded negative results in all cases, but an aviadenovirus was isolated from livers twice and a reovirus from the intestines once. Supplementation with vitamin E and selenium seemed to improve the situation. The most likely diagnosis is lipidosis, a metabolic disorder with complex etiology, which has rarely been described in turkeys.

Reporte de Caso—Patología hepática asociada con aumento de mortalidad en parvadas de pavos reproductores y de engorde.

Entre 2006 y 2011 se presentaron una serie de enfermedades caracterizadas por aumento de la mortalidad y problemas hepáticos en parvadas de pavos reproductores y de engorde en Alemania. Las parvadas tenían entre 12 y 23 semanas de edad y en su mayoría las gallinas fueron las más afectadas. Los signos clínicos fueron inespecíficos y estuvieron acompañados por mortalidad que osciló entre el 1% y 7%. Las aves afectadas mostraron hígados inflamados que presentaban aspecto marmoleado con áreas amarillentas y puntos negros y rojos. El pericardio estaba lleno de un fluido de color ámbar, y el surco coronario estaba extensivamente lleno de grasa. Los bazos se observaron inflamados y un fluido seroso que parecía salir del hígado, estaba presente en la cavidad corporal. Los hallazgos histopatológicos en todos los casos menos en uno incluyen degeneración grasa de los hepatocitos con colapso del parénquima y hemorragias asociadas. Algunos animales mostraron colangitis y hepatitis con cuerpos de inclusión intranucleares. En tres casos con reproductores, la microscopía electrónica detectó partículas virales que oscilaban entre 23 y 30 nm, similares a parvo o picornavirus. Además, se detectó ARN de picornavirus en los hígados de una parvada de pavos de engorde. Las investigaciones por PCR para circovirus, parvovirus, poliomavirus y aviadenovirus mostraron resultados negativos en todos los casos, pero se aisló un aviadenovirus a partir de hígados dos veces y un reovirus de los intestinos en una vez. La suplementación con vitamina E y el selenio parecieron mejorar la situación. El diagnóstico más probable fue lipidosis, un trastorno metabólico con etiología compleja, que rara vez se ha descrito en pavos.

Beak and feather disease virus (BFDV) is a member of the genus Circovirus and causes psittacine beak and feather disease (PBFD) in Psittaciformes. PBFD is a severe disease generally characterized by immunodeficiency and beak and feather disorders. Although Circovirus spp. have been detected in several nonpsittacine species, little is known about the symptoms and the disease associated with this infection in birds other than Psittaciformes. In this study, we report the identification of Circovirus infection in a flock of Gouldian finches showing beak and feather disorders. Sequence analyses on the rep gene of the virus highlighted a strong similarity at nucleotide and amino acid levels with the corresponding regions of BFDV from psittacine species. By contrast, it was more distant to circoviruses identified in finch and canary.

Reporte de Caso—Problema similar a la enfermedad del pico y las plumas (PBFD) de los psitácidos en diamantes de Gould (Chloebia gouldiae).

El virus de la enfermedad del pico y de las plumas (BFDV) es un miembro del género Circovirus y causa la enfermedad del mismo nombre (con las siglas en inglés PBFD) en psitácidos. La enfermedad del pico y las plumas es una enfermedad grave caracterizada generalmente por inmunodeficiencia y trastornos del pico y las plumas. Aunque se han detectado Circovirus spp. en varias especies no psitácidas, poco se sabe acerca de los signos y enfermedad asociadas con esta infección en las aves distintas a las Psittaciformes. En este estudio, se presenta la identificación de la infección por circovirus en una parvada de pinzones de Gould que mostraron trastornos de pico y plumas. El análisis de la secuencia del gene rep del virus mostró una gran similitud a nivel de nucleótidos y de aminoácidos con las regiones correspondientes al virus de la enfermedad del pico y plumas de las especies de psitácidos. Por el contrario, este virus fue más distante al circovirus identificado en el pinzón y en el canario.

Major outbreaks of avian type C botulism have been rarely reported from Central Europe. In this paper, we report the first severe outbreak of avian type C botulism in Poland. In 2011–12, two epizootics caused by Clostridium botulinum took place at Jeziorsko dam reservoir and affected an estimated number of 5500 birds in 2011 and 1600 birds in 2012. In total, 24 species of waterbirds were affected, including mainly waterfowl (37.0%), shorebirds (27.0%), rallids (25.7%), and larids (9.1%). Mallards (Anas platyrhynchos) and coots (Fulica atra) were most commonly represented among all affected species (27.5% and 25.0% of all recorded carcasses, respectively). Laboratory analyses confirmed the presence of type C botulinum toxin in the internal organs of paralyzed birds. This case study from the Jeziorsko dam reservoir demonstrates that this type of shallow-water habitat is especially prone to avian botulism outbreaks in the climatic conditions of Central Europe.

Reporte de Caso—Primer caso de un brote severo de botulismo aviar del tipo C en Polonia.

Brotes severos de botulismo aviar tipo C se han comunicado raramente en Europa Central. En este trabajo, se presenta el primer brote grave de botulismo aviar tipo C en Polonia. Entre los años 2011 al 2012, dos epizootias causadas por Clostridium botulinum se presentaron en la presa reservorio de Jeziorsko y afectaron a un número estimado de 5,500 aves en el 2011 y a 1,600 aves en el 2012. En total, 24 especies de aves acuáticas se vieron afectadas, principalmente se incluyen aves acuáticas (37.0%), aves costeras (27.0%), rálidos (25.7%) y láridos (9.1%). Ánades reales (Anas platyrhynchos) y fochas comunes (Fulica atra) estuvieron representados con mayor frecuencia entre todas las especies afectadas (27.5% y 25.0% de todas las canales registradas, respectivamente). Los análisis de laboratorio confirmaron la presencia de la toxina botulínica de tipo C en los órganos internos de aves paralizadas. Este estudio de caso de la presa Jeziorsko demuestra que este tipo de hábitat de aguas poco profundas es especialmente propenso a brotes de botulismo aviar en las condiciones climáticas de Europa Central.

A fowl typhoid (FT) outbreak is reported in a flock of 400 Japanese quail (Coturnix coturnix japonica) at 91 days of age. Of these, 222 died suddenly, and necropsy revealed swollen liver and spleen with off-white to yellowish granules and reddish small intestine mucosa. Histopathology showed severe multifocal necrosis of liver and spleen (5/5), pulmonary congestion with macrophage infiltration in air capillaries (5/5), discrete interstitial nephritis (2/2), superficial necrosis of the intestinal mucosa with large numbers of coccobacilli (2/2), moderate peritonitis (2/2), and discrete airsacculitis (1/1). Anti-Salmonella immunohistochemistry (IHC) stained the cytoplasm of macrophages or free in the liver (5/5), spleen (5/5), lungs (4/5), kidneys (2/2) small intestine mucosa (2/2), cecum (1/1), bone marrow (1/1), air sacs (1/1), and ovary (1/1). In the heart (5/5), brain (2/2), esophagus (2/2), pancreas (2/2), proventriculus (2/2), gizzard (1/1), bursa of Fabricius (1/1), oviduct (1/1), and skeletal muscle (1/1) staining was observed only in the lumen of blood vessels. Salmonella Gallinarum was isolated in pure cultures of liver, spleen, lung, intestine, and blood samples of two birds.

Reporte de Caso—Brote de tifoidea aviar (Salmonella Gallinarum) en codornices japonesas (Coturnix coturnix japonica).

Se describe un brote de tifoidea aviar en un lote de 400 codornices japonesas (Coturnix coturnix japonica) de 91 días de edad, de las cuales 222 murieron súbitamente. Se practicó la necropsia de cinco animales y se observó hígado aumentado de tamaño con puntos blanco amarillentos, bazo difusamente pálido de color blanco amarillento y la mucosa del intestino delgado se observó de un color rojizo. A la histopatología, se observó en el hígado y en el bazo marcada necrosis multifocal (5/5), congestión del pulmón asociada con infiltración de macrófagos en los capilares aéreos (5 /5), nefritis intersticial leve (2/2), necrosis superficial de la mucosa intestinal con gran cantidad de bacterias cocobacilares (2/2), peritonitis moderada (2/2) y aerosaculitis leve (1/1). El examen inmunohistoquímico para Salmonella demostró una fuerte tinción en el citoplasma de los macrófagos o de manera difusa en el hígado (5/5), bazo (5/5), pulmón (4/5), riñón (2/2) mucosa del intestino delgado (2/2) y el ciego (1/1), médula ósea (1/1), sacos aéreos (1/1) y ovario (1/1). Por otra parte, en el corazón (5/5), cerebro (2/2), esófago (2/2), páncreas (2/2), proventrículo (2/2), molleja (1/1), bolsa de Fabricio (1/1), oviducto (1/1) y músculo esquelético (1/1) se observó tinción positiva sólo en el lumen de los vasos sanguíneos. Se aisló Salmonella Gallinarum en cultivo puro de muestras de hígado, bazo, pulmón, intestino y de la sangre de dos aves.

Gastric duplication (choristoma) is a very rare anomaly in both humans and other animal species. We report herein a case of proventricular cystic choristoma in a 62-day-old broiler chicken. The broiler chicken was brought from the slaughterhouse to our laboratory after a pale-brown cystic structure closely attached to a thin, compressed spleen was identified. On necropsy, the cystic structure showed a clear mucinous fluid. Histopathologically, the cystic structure was lined by proventricular mucosa presenting in folds and sulci. Submucosal proventricular glands, consisting of secretory units and collecting tubules, occupied parts of the choristomal wall. The gastric mucosa lining the choristomal wall stained positive with periodic acid-Schiff stain, stained negative with Alcian blue staining, and showed a thin layer of smooth muscle fibers and a thick connective tissue layer with Masson trichrome. Ectopic pancreas was noticed attached to the wall of the choristoma. To the best of our knowledge, this represents the first report of choristoma in an avian species.

Reporte de Caso—Duplicación gástrica: Coristoma quístico proventricular en el bazo de un pollo de engorde.

La duplicación gástrica (coristoma) es una anomalía muy rara en los seres humanos y en otras especies animales. En este artículo se presenta un caso de un coristoma quístico proventricular en un pollo de engorde de 62 días de edad. El pollo de engorde fue remitido al laboratorio desde la planta de procesamiento después de que se identificó una estructura quística marrón pálida estrechamente unida al bazo, el cual se encontraba comprimido y delgado. A la necropsia, la estructura quística mostró un líquido mucinoso claro. Histopatológicamente, la estructura quística estaba revestida por mucosa proventricular que presentaba pliegues y surcos. Las glándulas proventriculares submucosas, que constaban de unidades secretoras y de túbulos colectores, ocuparon partes de la pared del coristoma. La mucosa gástrica que revestía la pared del coristoma mostró tinción positiva con ácido peryódico de Schiff (PAS), y mostró reacción negativa con la tinción de azul de Alcian, y mostró una fina capa de fibras musculares lisas y una capa gruesa de tejido conectivo mediante la tinción tricrómica de Masson. Se observó un páncreas ectópico pegado a la pared de la coristoma. De acuerdo con el conocimiento de los autores, este es el primer informe de un coristoma en una especie aviar.